2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、Pif1蛋白是解旋酶SF1B超家族成員,能夠利用ATP水解提供的能量,對(duì)雙鏈DNA(dsDNA),DNA/RNA雜合體,G4 DNA(G-quadruplex DNA)進(jìn)行5'→3'方向的解旋,是生物體內(nèi)非常重要的一類解旋酶。由于其結(jié)合底物的多樣性,Pif1參與了細(xì)胞中多種生物學(xué)過程調(diào)控。Pif1可以通過解鏈端粒酶模板RNA與端粒DNA,使端粒酶從端粒游離下來,從而調(diào)控端粒的長(zhǎng)度。在復(fù)制及轉(zhuǎn)錄過程中,Pif1能夠迅速解開G4結(jié)構(gòu),維持基

2、因組穩(wěn)定性。Pif1還參與了岡崎片段的成熟及DNA損傷修復(fù)的BIR(Break-induced replication)通路,而且Pif1在核糖體DNA(ribosomal DNA,rDNA)的復(fù)制過程及線粒體基因組穩(wěn)定性維持等方面也發(fā)揮了重要作用。
  本文主要利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng),在體外分別構(gòu)建了釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)ScPif1,人源hPif1,細(xì)菌(Bacteroides sp)BaP

3、if1全長(zhǎng)及對(duì)應(yīng)的解旋酶結(jié)構(gòu)域(Helicase domain,HD)截短。利用X光晶體衍射技術(shù),解析了細(xì)菌BaPif1全長(zhǎng),人源hPif1-HD截短的單體結(jié)構(gòu),以及BaPif1與單鏈DNAdT10,與雙鏈DNA dH的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)。對(duì)比單體結(jié)構(gòu)與復(fù)合物結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)BaPif1結(jié)合DNA后發(fā)生了顯著的構(gòu)象變化,2A、2B結(jié)構(gòu)域分別發(fā)生了近20°、50°的旋轉(zhuǎn),并且這種構(gòu)象變化對(duì)于Pif1行使解旋酶功能是必須的;BaPif1與雙鏈DNAH復(fù)

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