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1、中圖分類號R2358UDC610博士學位論文學校代碼lQ533miRNA200家族成員參與TGF131誘導膽囊腺癌EMT的機制研究ThestudyofthemechanismofmiRNA200familymembersonregulatingTGFp1一inducedepithelial—mesenchymaltransitioningallbladderadenocarcinoma作者姓名:鄒瓊學科專業(yè):臨床醫(yī)學研究方向:外科學學院
2、(系、所):湘雅二醫(yī)院指導教師:楊竹林教授論文答辯日期壟坐毒蘭旦望毋答辯委員會主席中南大學2014年5月旭叛miIⅢA200家族成員參與TGFB1誘導膽囊腺癌EMT的機制研究摘要第一章miRNA200家族成員在膽囊腺癌中表達及意義目的:通過對正常膽囊上皮細胞株與膽囊腺癌細胞株GBCSD之間的差異miRNA表達譜的比較及組織樣本進一步驗證miRNA200家族成員表達變化,并分析其表達水平與膽囊腺癌臨床病理特征的相關(guān)性,以期為原發(fā)性膽囊癌的
3、侵襲和轉(zhuǎn)移機制提供一定的理論依據(jù)。方法:1、使用miRNA芯片檢測正常膽囊上皮細胞株與膽囊腺癌細胞株GBC—SD之間miRNA表達譜的變化。2、realtimePCR檢測14例膽囊腺癌及其癌旁相對正常新鮮組織中miRNA200b和miRNAl41的表達以驗證miRNA芯片的結(jié)果。3、鎖定核酸原位雜交檢測53例原發(fā)性膽囊腺癌及其癌旁組織石蠟包埋樣本中miRNA200b和miRNAl41的表達水平及miRNA在組織中的分布情況,進而分析這兩
4、種miRNAs的表達水平與膽囊腺癌臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果:1、miRNA芯片結(jié)果顯示與正常膽囊上皮細胞株相比,GBCSD細胞株中miRNA表達存在差異的miRNA共有150個,其中有89個miRNAs表達上調(diào),61個miRNAs表達下調(diào)。miRNA200家族成員miR200a、miR200b、miR200c、miR一141表達均明顯下調(diào)。2、膽囊腺癌組織中miRNAl41和miRNA200b的表達明顯低于癌旁組織,realtime
5、PCR檢測與miRNA芯片結(jié)果相比,miRNAl41和miRNA200b的變化趨勢是一致的。3、鎖定核酸原位雜交發(fā)現(xiàn)膽囊腺癌組織中miRNA200b和miRNAl41的表達明顯低于及其癌旁正常組織、慢性膽囊炎組織,且miRNA200b和miRNAl41的低表達與腫瘤的周圍組織侵犯、局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤TNM分期有顯著相關(guān)性。結(jié)論:miRNA芯片篩選出正常膽囊上皮細胞株與GBC—SD細胞株中存在差異表達的miRNA共有150個,其中有89
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