保健食品中大豆異黃酮測(cè)定方法研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的: 本研究擬探討保健食品中ISO的提取和測(cè)定條件:樣品提取物不水解,以毒性較小的甲醇-水溶液體系為流動(dòng)相;比較用紫外檢測(cè)器,熒光檢測(cè)器,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)效果(擬選擇最佳檢測(cè)器);同時(shí)測(cè)定上述四種物質(zhì)。分析步驟簡(jiǎn)單、高效;流動(dòng)相毒性小,不使用酸、緩沖鹽,可以有效的保護(hù)儀器,延長(zhǎng)使用壽命。 方法和結(jié)果: 方法一:建立了高效液相色譜法-紫可見光檢測(cè)器測(cè)定食品中D、G、De、Ge含量的方法,探討樣品測(cè)定的影響因素

2、。樣品用甲醇+水(80+20,v/v)超聲提取30min,離心定容后過0.45μm濾膜,經(jīng)200×4.6mm5μm的C18柱分離,以甲醇+水(60+40,v/v)作流動(dòng)相,時(shí)間程序洗脫,紫外檢測(cè)器以波長(zhǎng)程序測(cè)定,測(cè)定時(shí)間只需15min,D、G、De、Ge分離良好,相關(guān)系數(shù)分別為0.9999、0.9999、0.9999、0.9996,樣品的加標(biāo)回收率為90.2%-108.4%,RSD在0.93%-5.2%之間。日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.2

3、%-2.5%。該方法前處理簡(jiǎn)單,準(zhǔn)確快速,可作為同時(shí)測(cè)定保健食品中四種大豆異黃酮含量的方法。方法二:建立了一種同時(shí)測(cè)定保健食品中的四種大豆異黃酮D、G、De、Ge的蒸發(fā)光散射檢測(cè)器高效液相色譜法。色譜柱:Cromasail200×4.6mm5μm的C18柱,流動(dòng)相:甲醇-水梯度洗脫,流速1.0ml/min,ELSD:撞擊器關(guān),霧化器氣體流速2.7L/min,漂移管溫度104℃。樣品經(jīng)研磨后,用80%甲醇水溶液超聲提取30min,定容離心

4、后過0.45μm濾膜,進(jìn)樣20μ1。測(cè)定時(shí)間只需15min左右,D、G、De、Ge分離良好。梯度洗脫基線平直,線性范圍2.6μg/ml-150μg/ml,D、De、G、Ge的相關(guān)系數(shù)分別為0.9999、0.9994、0.9999、0.9996。加標(biāo)回收率:89.7%-103.2%,RSD在1.2%-5.5%之間。日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%-3.0%。本方法前處理簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速,可作為同時(shí)測(cè)定四種大豆異黃酮含量的方法。方法三:建立了高效

5、液相色譜法-熒光檢測(cè)器測(cè)定食品中De含量的方法,探討樣品測(cè)定的影響因素。樣品用甲醇+水(80+20,v/v)超聲提取30min,離心定容后過0.45μm濾膜,經(jīng)200×4.6mm5μm的C18柱分離,以甲醇+水(60+40,v/v)作流動(dòng)相,時(shí)間程序洗脫,熒光檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定,檢測(cè)器激發(fā)波長(zhǎng)Ex=366nm、發(fā)射波長(zhǎng)Em=417nm,方法線性范圍為0.5μg/ml-30μg/ml,回歸曲線為Y=13924X-8625,r=0.9995。樣

6、品的加標(biāo)回收率為90.2%-108.4%,RSD在0.93%-5.2%之間。 結(jié)論: 本研究探討了分離ISO的流動(dòng)相的配比、流速,運(yùn)用了時(shí)間流速程序和時(shí)間波長(zhǎng)程序,以目前新興的蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器和紫外檢測(cè)器為手段,建立測(cè)定保健食品中的ISO液相色譜法,為調(diào)查、監(jiān)督保健食品中的ISO含量提供分析方法,為更進(jìn)一步研究ISO對(duì)人體作用的分子機(jī)制和衛(wèi)生監(jiān)督提供保障。同時(shí)應(yīng)用本方法對(duì)市場(chǎng)上幾種相關(guān)保健品和豆制品進(jìn)行了檢測(cè)

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