從中藥中虛擬篩選和鑒定細(xì)菌群體感應(yīng)抑制劑.pdf

1、長(zhǎng)久以來(lái)，使用抗生素是人類對(duì)付致病菌感染的有效方法，然而伴隨抗生素的廣泛使用，越來(lái)越多的致病菌對(duì)抗生素產(chǎn)生了耐藥性，威脅人類的健康。群體感應(yīng)抑制劑（Quorum Sensing inhibitor，QSI）的發(fā)現(xiàn)為對(duì)抗耐藥性致病菌提供了新的思路與希望。 群體感應(yīng)（Quorum Sensing，QS）是細(xì)菌根據(jù)環(huán)境中種群密度來(lái)調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)從而協(xié)調(diào)細(xì)菌行為的機(jī)制。許多致病菌如銅綠假單胞菌通過(guò)QS系統(tǒng)控制致病因子的表達(dá)和生物膜的形

2、成。其中生物膜的形成使得致病菌對(duì)抗生素的抗性提高1000倍。因此抑制致病菌的QS系統(tǒng)可以抑制致病菌的致病性和增加耐藥致病菌對(duì)抗生素的敏感性。 本研究的目的是篩選適合人類使用的QSIs。本研究采用虛擬篩選和生物學(xué)驗(yàn)證相結(jié)合的方法，從中藥活性成分中篩選QSIs。 虛擬篩選使用DOCK5.3.0軟件，將TraR蛋白與自建數(shù)據(jù)庫(kù)的候選物質(zhì)進(jìn)行對(duì)接。自建數(shù)據(jù)庫(kù)包含51種具有治療肺炎和支氣管炎效果的中藥活性成分。虛擬篩選的結(jié)果顯示十

3、幾種中藥活性成分可能會(huì)有良好的QSI活性。隨后的生物學(xué)驗(yàn)證證實(shí)黃芩素是有效的QSI。 生物學(xué)實(shí)驗(yàn)證明黃芩素在20μM時(shí)能有效抑制銅綠假單胞菌的生物膜形成，而不抑制該菌的生長(zhǎng)。此外，黃芩素能增加銅綠假單胞菌對(duì)氨芐青霉素的敏感性。黃芩素在40 mM，30分鐘內(nèi)能促進(jìn)QS受體蛋白TraR的有效降解，這可能是黃芩素抑制QS系統(tǒng)的分子機(jī)制。 黃芩素是中藥黃芩的主要有效成分。黃芩在中國(guó)被廣泛用來(lái)治療感染已有數(shù)千年歷史。研究表明黃芩素