阪崎腸桿菌群體感應(yīng)信號(hào)分子的產(chǎn)生及其對(duì)生物膜形成的影響.pdf

1、阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii)是一種條件病原菌，嬰幼兒或免疫功能不全的病人容易感染，引起嚴(yán)重的腦膜炎或腸炎。該菌在許多不同類(lèi)型的食品以及奶制品加工設(shè)備中都有發(fā)現(xiàn)，特別是嬰幼兒配方奶粉，它是主要污染來(lái)源，常與感染該菌引發(fā)的疾病爆發(fā)相關(guān)。在如此環(huán)境下生存并繁殖的原因可能是由于阪崎腸桿菌的具有粘附以及形成生物膜的能力。
　　群體感應(yīng)是依賴(lài)于細(xì)胞密度的細(xì)胞間交流過(guò)程。它包括具有擴(kuò)散性的信號(hào)分子，其通過(guò)激活目標(biāo)基

2、因來(lái)控制密度依賴(lài)行為，如生物膜形成、群集運(yùn)動(dòng)、色素合成、胞外多糖合成以及抗生素的產(chǎn)生過(guò)程等。
　　當(dāng)前用抗生素來(lái)治療細(xì)菌性疾病的方法受到耐藥性細(xì)菌傳播的嚴(yán)重威脅，耐藥性細(xì)菌可導(dǎo)致持續(xù)性感染，且常涉及到高抗性生物膜的形成，生物膜的形成與群體感應(yīng)機(jī)制的表達(dá)密切相關(guān)，但是它們?cè)谮嫫槟c桿菌的的作用模式并不清晰。
　　本文旨在研究阪崎腸桿菌信號(hào)分子的產(chǎn)生以及?；呓z氨酸內(nèi)酯降解與生物膜形成的關(guān)系。本研究還報(bào)道了阿魏植物精油的抗群體感應(yīng)

3、活性，它可以干擾細(xì)菌的交流系統(tǒng)。但它對(duì)阪崎腸桿菌的抑制活性還需要進(jìn)一步研究確認(rèn)。本文研究結(jié)果如下：
　　1.A. tumefaciens NTL4(pZLR4), C. violaceum CVO26作為生物檢測(cè)的報(bào)告菌來(lái)檢測(cè)?；呓z氨酸內(nèi)酯。實(shí)驗(yàn)方法包括瓊脂試驗(yàn)(平行畫(huà)線法，瓊脂擴(kuò)散法)、TLC-生物傳感器分析、β-半乳糖苷酶活性試驗(yàn)。這些方法結(jié)合生物傳感器，試驗(yàn)靈敏、簡(jiǎn)單且合理。
　　2.阪崎腸桿菌 ATCC51329所

4、產(chǎn)生的?；呓z氨酸內(nèi)酯通過(guò) TLC-生物傳感器試驗(yàn)分析，檢測(cè)出了兩種結(jié)構(gòu)的信號(hào)分子：(S)-N-3-oxo-hexanoyl-HSL和(S)-N-3-oxo-octanoyl-HSL。
　　3.采用 HPLC-MS法對(duì)阪崎腸桿菌 ATCC51329產(chǎn)生的分子進(jìn)一步鑒定，結(jié)果表明，這株菌產(chǎn)生5種可鑒定的分子： C12-HSL, C14-HSL,3-oxo-C4-HSL3-OH-C8-HSL, UHQ。
　　4.阪崎腸桿菌產(chǎn)生的

5、acyl-HSLs被A. tumefaciens NT1(pZRL4)(pME6863)所消耗，說(shuō)明acyl-HSLs被A. tumefaciens NT1(pZRL4)(pME6863)中的水解酶所降解。這一過(guò)程同時(shí)也降低阪崎腸桿菌生物膜的形成。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明了生物膜的形成與acyl-HSLs信號(hào)分子的濃度關(guān)系密切。
　　5.采用肉湯微量稀釋法對(duì)阿魏精油的抗菌活性進(jìn)行了研究，同時(shí)使用紫色桿菌作為細(xì)菌模型對(duì)阿魏精油的群體抑制劑活