產(chǎn)低溫淀粉酶菌株的篩選及其酶學(xué)性質(zhì)的研究.pdf

1、本文依據(jù)新疆特殊的地理環(huán)境，采集低溫土樣，定向篩選產(chǎn)低溫淀粉酶的微生物以解決酶來(lái)源的問(wèn)題。 從來(lái)自新疆準(zhǔn)噶爾盆地北緣的富蘊(yùn)和青河縣的低溫土樣中定向篩選得到一株產(chǎn)低溫淀粉酶的野生菌株(LA77)，根據(jù)菌生理生化鑒定為中間氣單胞菌(Aeromonasmedia)。LA77發(fā)酵產(chǎn)生的低溫淀粉酶最適作用溫度為30℃，最佳pH為6.0，其熱穩(wěn)定性較差，在30℃與40℃保溫30min后能保持70％和18％左右的酶活力；金屬離子Ca2+、K+

2、對(duì)酶有不同程度的激活作用，而Cu2+、Hg2+等則對(duì)酶有明顯的抑制作用。對(duì)該菌株產(chǎn)低溫淀粉酶實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵條件進(jìn)行研究得出最佳發(fā)酵條件為：碳源1％，氮源2％，500ml三角瓶裝液100ml，20℃，200r/min搖床培養(yǎng)48小時(shí)，酶活最高可達(dá)23.83u/ml。 LA77發(fā)酵過(guò)程產(chǎn)生的低溫淀粉酶為胞外分泌型，發(fā)酵液經(jīng)過(guò)鹽析純化后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢驗(yàn)純度，凝膠染色后只有一條帶，依據(jù)已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白結(jié)果計(jì)算，其分子量約