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文檔簡介
1、本文依據(jù)新疆特殊的地理環(huán)境,采集低溫土樣,定向篩選產(chǎn)低溫淀粉酶的微生物以解決酶來源的問題。 從來自新疆準(zhǔn)噶爾盆地北緣的富蘊和青河縣的低溫土樣中定向篩選得到一株產(chǎn)低溫淀粉酶的野生菌株(LA77),根據(jù)菌生理生化鑒定為中間氣單胞菌(Aeromonasmedia)。LA77發(fā)酵產(chǎn)生的低溫淀粉酶最適作用溫度為30℃,最佳pH為6.0,其熱穩(wěn)定性較差,在30℃與40℃保溫30min后能保持70%和18%左右的酶活力;金屬離子Ca2+、K+
2、對酶有不同程度的激活作用,而Cu2+、Hg2+等則對酶有明顯的抑制作用。對該菌株產(chǎn)低溫淀粉酶實驗室發(fā)酵條件進行研究得出最佳發(fā)酵條件為:碳源1%,氮源2%,500ml三角瓶裝液100ml,20℃,200r/min搖床培養(yǎng)48小時,酶活最高可達23.83u/ml。 LA77發(fā)酵過程產(chǎn)生的低溫淀粉酶為胞外分泌型,發(fā)酵液經(jīng)過鹽析純化后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢驗純度,凝膠染色后只有一條帶,依據(jù)已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白結(jié)果計算,其分子量約
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