精氨酸脫亞氨基酶基因克隆及在大腸桿菌中表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、南京理工大學碩士學位論文精氨酸脫亞氨基酶基因克隆及在大腸桿菌中表達姓名：茅立華申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化工指導教師：李大力20050501塑—里一——堡主堡蘭CloningandexpressionofArginineDeiminasegeneinEeoliABSTRACTAsoneofthenonproteinaminoacids，citrullineplaysa11importantroleintheureacycleCitru

2、llinealsohasalotofimportantphysiologicalfunctionsintheareasuchaSpharmaceuticals，cosmeticetcArgininedeiminase(ADI)isallenzymewhichcancatalyzetheiminehydrolysisofargininetoproducecitrullineandammoniaItisadeclinetouseADIint

3、hecitrullineproductionindustryExpressingADIgeneinEcoliisalleffectivewaytogetADIFirstlyADIgenewasclonedfromtheDNAofPseudomonasputidabyPCR，thentheclonedgene嘲constructedwith腳asmidpET30aandpBV220andtransformedintoEcoliBL21(D

4、E3)andJMl09ThetweeomNnantstrainswerenamedasBL21(DE3)QET30aci0andJMl09(pBV220一tit)respectivelyTheDNAsequenceofclonedgenehad10％differencefromthatofPseudomonasputidaATCC4359inGenBank，whiletheaminoacidssequenceofclonedgeneWa

5、SthesamewithPseudomonasputidaATCC4359UndertheinductionofO1％IPTGtheexpressionofBL21(DE3)(pET30acit、showed2357U／mLenzymeactivityHowever，theADIenzymeactivityofJMl09(pBV220ciOhadnotbeendetectedTheresultofSDSPAGEshowedthatthe

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