裸燕麥球蛋白及其酶解物的制備和抗氧化活性研究.pdf

1、以裸燕麥為原料，采用Osborne蛋白分級(jí)方法分離提取裸燕麥球蛋白，并利用鹽析、Sephadex G-100凝膠過濾層析、SDS-PAGE電泳等方法對(duì)其純化。研究結(jié)果表明：裸燕麥球蛋白提取的最佳條件為：NaCl濃度10％，料液比1：10，提取時(shí)間35min，提取5次，提取率可達(dá)90%以上。裸燕麥球蛋白的硫酸銨飽和度為60%。在柱層析分離條件下（洗脫速度為3～7mL/10min，緩沖溶液為蒸餾水），得到的組分I分子量范圍分布在25kDa、

2、34～29kDa、44kDa，組分II分子量范圍分布在19kDa、23kDa、25kDa。
　　采用蛋白酶水解裸燕麥球蛋白，篩選最佳水解蛋白酶，獲得最佳酶解工藝，并利用Sephadex G-25凝膠層析進(jìn)行純化及其分子量測定。結(jié)果表明：采用堿性蛋白酶水解，酶用量10000U/g，底物濃度5%，溫度60℃，pH值9.0，水解3h后水解度達(dá)75%以上，清除率達(dá)60%以上。酶解液經(jīng)分離純化得到圖譜為2個(gè)峰，分別為組分I（分子量范圍：10

3、738Da～133929Da）和組分II（分子量范圍：114Da～861Da）。
　　分別對(duì)裸燕麥球蛋白、酶解物、分離組分I、分離組分II清除·OH、O2ˉ·、DPPH·能力進(jìn)行研究，并對(duì)球蛋白及其酶解物的溶解性、乳化性、粘度、起泡性等功能特性進(jìn)行測定。研究結(jié)果表明：測得組分 II清除·OH(IC500.589mg/mL）、O2ˉ·（IC501.783mg/mL）、DPPH·（IC500.095mg/mL）能力高于其他三個(gè)組分。p

4、H值在3.0～9.0時(shí)酶解物溶解性較球蛋白顯著提高，達(dá)93%以上；當(dāng)pH7.0時(shí)裸燕麥球蛋白的乳化性及乳化穩(wěn)定性最小，為18.1㎡/g和13.0㎡/g，當(dāng)pH5.0時(shí)酶解物的乳化性及乳化穩(wěn)定性最小，為55.2㎡/g和32.8㎡/g，顯示了酶解物較高的乳化性能力；裸燕麥球蛋白及其酶解物濃度在1.5%～10%時(shí)，粘度變化較為平緩，但當(dāng)濃度高于10%時(shí)，粘度上升較快。其中球蛋白粘度較酶解物的高；在 pH5.0時(shí)球蛋白及其酶解物的起泡性最低，其