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1、乳清蛋白濃縮物(WPC)是生產(chǎn)嬰幼兒配方粉的重要原料,牛乳乳清蛋白含有18-24%的a-乳白蛋白(a-La)和56-60%的β-乳球蛋白(β-Lg)。a-La是人乳中的重要蛋白成分,牛乳與人乳的a-La有72%的氨基酸序列完全一致;而β-Lg是一種重要的過(guò)敏原,人乳中不含這種蛋白。因此脫除WPC中的β-Lg對(duì)于生產(chǎn)低過(guò)敏、高母乳化的新型嬰幼兒配方粉具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)研究了如何利用蛋白酶進(jìn)行優(yōu)先降解WPC中的β-Lg。 確定了用
2、SDS-PAGE電泳定量分析a-La和β-Lg的方法。a-La和β-Lg的進(jìn)樣量分別為0.40μg~1.20μg和0.48 μg~1.44μg,在此范圍內(nèi)a-La和B-Lg召的含量與電泳條帶灰度的線(xiàn)性關(guān)系良好。用SDS-PAGE法測(cè)得WPC8200樣品中a-La和e-Lg的含量分別為18.44%和45.68%。 選用了Flavourzyme(米曲霉)、Neutrase(枯草桿菌)、ProteaseA(米曲霉)、Protease
3、N(枯草桿菌)、Protease S(嗜熱脂肪芽孢桿菌)五種蛋白酶水解WPC8200,用TNBS法測(cè)定水解液的水解度,用SDS-PAGE電泳法分析水解液中的a-La和β-Lg的存余率。通過(guò)比較水解液中的a-La和β-Lg的存余率,篩選出ProteaseA具有優(yōu)先降解WPC中β-Lg的能力。 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),以水解度、蛋白存余率、水解物溶解性為指標(biāo),優(yōu)化了Protease A優(yōu)先降解β-Lg的工藝,即Protease
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