毛細管電泳法在酚類化合物和DNA檢測中的應用研究.pdf

1、目的：將毛細管電泳法應用于衛(wèi)生檢驗學中，針對化學污染物苯酚、3-氯酚等酚類化合物和沙門氏菌的invA基因、志賀菌的ipaH基因、大腸桿菌O157：H7的uidA基因的多重PCR產(chǎn)物以及人原癌基因N-ras基因損傷，分別研究它們的毛細管電泳檢測方法，為環(huán)境中酚類物質(zhì)污染的評價和食源性致病菌及環(huán)境化學致癌物導致DNA損傷的檢測提供快速、靈敏、可靠的分析方法和實驗依據(jù)。 方法：優(yōu)化了水樣的前處理和苯酚及3-氯酚測定條件，優(yōu)化了上述DN

2、A分子的測定條件，分別建立了兩種毛細管電泳分析方法：1.建立了化學發(fā)光檢測裝置，并將其與毛細管電泳裝置相連。環(huán)境水樣中的苯酚及3-氯酚經(jīng)D101大孔樹脂柱凈化后，用毛細管電泳-化學發(fā)光法測定。 2.沙門菌的invA基因、志賀菌的ipaH基因、大腸桿菌O157：H7的uidA基因通過多重PCR擴增，N-ras基因通過依賴隨機化末端連接物PCR(Randomizedterminallinker-dependentpolymerase

3、chainreaction，RDPCR)技術擴增，用激光誘導熒光-毛細管電泳法檢測。 結(jié)論： 1.建立了毛細管電泳-化學發(fā)光法(CE-CL)檢測水樣中苯酚和3-氯代酚含量的方法。本方法利用毛細管電泳的高分離效能和高靈敏度的化學發(fā)光檢測器，在10min內(nèi)就可完成分析。與高效液相色譜法相比，毛細管電泳法消耗試劑量少，所用的毛細管價廉，綠色環(huán)保。本文為評價水環(huán)境中苯酚和3-氯酚的污染提供一種簡單、靈敏、快速的方法。 2

4、.建立了毛細管電泳-激光誘導熒光法檢測沙門菌、志賀菌、大腸桿菌O157：H7基因多重PCR產(chǎn)物的方法。本方法采用無膠篩分毛細管電泳作為分離手段，配以激光誘導熒光檢測器，同時快速檢測三種食源性致病菌。所建立的方法可以應用于多種細菌DNA分子的檢測。與傳統(tǒng)的凝膠電泳相比，本方法快速、靈敏、準確，在國內(nèi)尚未見報道。此外還建立了N-ras基因DNA損傷的毛細管電泳-激光誘導熒光檢測方法，與Southern雜交方法相比，本方法快速且分辨率高。所建