生姜蛋白酶的研究.pdf

1、生姜蛋白酶是一種有待開(kāi)發(fā)利用的新的植物蛋白酶，本文對(duì)生姜蛋白酶酶活的測(cè)定方法、生姜蛋白酶粗酶的制備、生姜蛋白酶的穩(wěn)定性及其應(yīng)用進(jìn)行了研究。
　　 確定了生姜蛋白酶酶活測(cè)定方法。在酪蛋白溶液濃度為1%，反應(yīng)溫度為50℃，檸檬酸一磷酸氫二鈉緩沖液(pH6.0)濃度為0.05mol/L的條件下準(zhǔn)確反應(yīng)4min，加2mL三氯乙酸(0.4mol/L)終止反應(yīng)；用紫外分光光度法測(cè)定產(chǎn)物酪氨酸的含量。本方法RSD=1.397%，重復(fù)性好，可以

2、作為生姜蛋白酶酶活的檢測(cè)方法。
　　 研究了生姜蛋白酶粗酶的提取方法，確定提取工藝為:生姜:pH7.0磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液(0.1mol/L)=1:4，用豆?jié){機(jī)打成漿，在4℃下放置1h，抽濾，棄雜質(zhì)，所得清液即是生姜蛋白酶的抽提液；向抽提液中緩慢加入1.7倍(v/v)95%的工業(yè)酒精沉淀酶蛋白，抽濾干燥后所得沉淀即為粗酶。其比活力達(dá)到155.36U/mg蛋白。
　　 研究了生姜的儲(chǔ)存溫度和方式、酶的儲(chǔ)存溫度、金屬

3、離子、巰基試劑、螯合劑、抗氧化劑對(duì)生姜蛋白酶穩(wěn)定性的影響。發(fā)現(xiàn)生姜在-20℃下冷凍儲(chǔ)存63d，生姜蛋白酶的酶活沒(méi)有損失，漿狀儲(chǔ)存方式優(yōu)于塊狀儲(chǔ)存方式；溫度對(duì)生姜蛋白酶的影響較大，生姜蛋白酶在-20℃下保存14d沒(méi)有酶活損失，而在4℃與室溫下分別于14d和6d全部失活。Cu2+、Zn2+、Mg2+對(duì)生姜蛋白酶的酶活具有抑制作用，抑制能力Cu2+>Mg2+>Zn2+，Na+、Mn2+、Ca2+對(duì)生姜蛋白酶的酶活影響不大，F(xiàn)e2+具有激活生姜

4、蛋白酶的作用，較空白(未添加Fe2+)提高了9.82倍；巰基試劑對(duì)生姜蛋白酶的激活效果為半胱氨酸>巰基乙醇>DTT。10mmol/L的EDTA能夠使生姜蛋白酶的酶活提高12.62%?？寡趸瘎┊惪箟难徕c對(duì)生姜蛋白酶酶活具有抑制作用。
　　 考察了生姜蛋白酶在啤酒、黃酒生產(chǎn)中的應(yīng)用。在啤酒糖化的應(yīng)用研究中，確定了生姜蛋白酶最佳添加階段為糖化溫度升至63℃時(shí)；當(dāng)生姜蛋白酶添加量為105.98U/kg原料時(shí)，輔料量為40%的麥汁中α-