多種生姜有效成分的聯(lián)合提取及生姜蛋白酶的膜分離技術(shù).pdf

1、生姜是我國(guó)的傳統(tǒng)優(yōu)勢(shì)和特色資源之一，在國(guó)際市場(chǎng)上占有非常重要的地位。我國(guó)生姜生產(chǎn)歷史悠久，品質(zhì)優(yōu)良，但其產(chǎn)后加工技術(shù)水平比較低，多以原料的形式參與國(guó)際市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)，嚴(yán)重制約了我國(guó)生姜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，迫切需要高附加值的產(chǎn)品來提升我國(guó)生姜深加工整體技術(shù)水平。
　　本實(shí)驗(yàn)以優(yōu)質(zhì)萊蕪大姜為原料，研究聯(lián)合提取生姜中姜辣素、姜黃素以及生姜蛋白酶三種有效成分，利用單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳提取方案，并在此方案基礎(chǔ)上重點(diǎn)對(duì)生姜蛋白酶進(jìn)行純化，

2、利用電泳實(shí)驗(yàn)測(cè)定生姜蛋白酶的分子量，再分別采用膜分離技術(shù)和柱層析方法對(duì)生姜蛋白酶進(jìn)行純化。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)聯(lián)合提取最佳工藝的研究
　　采用乙醇溶劑法結(jié)合旋蒸對(duì)生姜中的姜辣素、姜黃素以及生姜蛋白酶進(jìn)行分離，確定了聯(lián)合提取的最佳工藝條件為生姜與無水乙醇料液比1∶3(w/v)，生姜蛋白酶提取中緩沖液pH為6.5，冰浴時(shí)間7h;姜辣素、姜黃素旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)最佳溫度為60℃，轉(zhuǎn)速為16rpm。在此優(yōu)化條件下，生姜中姜辣素、姜黃

3、素的提取率分別為3.143‰、3.889‰;生姜蛋白酶的提取率為1.376％，比活力達(dá)到4.465×106U/g，接近國(guó)標(biāo)GB/T23527要求(5.0×104U/g)的100倍。
　　(2)生姜蛋白酶分子量的確定
　　經(jīng)過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳得到生姜蛋白酶有兩種，分子量分別為33.3kDa、15.7kDa。
　　(3)膜分離技術(shù)純化生姜蛋白酶的最佳工藝
　　使用分子量為10KDa、30KDa和50KDa的

4、聚醚砜膜包，在常溫下進(jìn)行超濾，其超濾最佳條件為緩沖液pH值6.98，操作壓力為0.8bar，料液比1∶4。超濾得到的15.7kDa的生姜蛋白酶比活力為6.43×103U/g，含量很少，33.3KDa的生姜蛋白酶為主，比活力為5.369×106U/g，超過國(guó)標(biāo)GB/T23527要求(5.0×104U/g)的100倍。
　　(4)柱層析純化生姜蛋白酶
　　使用SephadexG-50Medium為填料純化生姜蛋白酶，最佳層析柱為