生姜蛋白酶的固定化研究.pdf

1、本研究以殼聚糖為原料，對殼聚糖微球的制備條件及其性質(zhì)、生姜蛋白酶的固定化條件、固定化生姜蛋白酶的酶學(xué)性質(zhì)及若干試劑對固定化生姜蛋白酶活性的影響進(jìn)行了研究，主要研究結(jié)果如下： 1、采用乳化.交聯(lián)法制備了活性殼聚糖微球，其最佳制備條件為：殼聚糖溶膠濃度為3％、油水比為2:1、攪拌時(shí)間為90min、戊二醛用量為1mL、乙酸乙酯用量為8mL。在此條件下制備的殼聚糖微球具有吸附性能好、溶脹度好、形態(tài)大小均一、耐酸堿性較強(qiáng)等優(yōu)良性狀。

2、 2、采用吸附.交聯(lián)法固定生姜蛋白酶，通過單因素試驗(yàn)，分析了給酶量、戊二醛終濃度、交聯(lián)時(shí)間及吸附時(shí)間對酶固定化效果的影響。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用L9(34)正交試驗(yàn)確定了生姜蛋白酶的最佳固定化條件為：給酶量為0.6mg/g、戊二醛終濃度為0.8％、交聯(lián)時(shí)間為2h、吸附時(shí)間為16h，所得固定化生姜蛋白酶活力為672.6U/g，酶活回收率為69.3％。 3、對固定化生姜蛋白酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究，結(jié)果表明：固定化生姜蛋白酶的最適

3、pH為5.0，與游離酶比向酸性方向偏移了一個(gè)單位；最適溫度為70℃，比游離酶提高了10℃。與游離酶相比，固定化生姜蛋白酶的酸堿穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性均有明顯的提高，有利于提高生姜蛋白酶的利用率，進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。 4、有機(jī)試劑及食品食品添加劑對固定化生姜蛋白酶和游離生姜蛋白酶活性的影響，結(jié)果表明：乙醇、乙二醇、甲醇、亞硫酸氫鈉、氯化鈉對固定化酶和游離酶均有抑制作用；尿素和蔗糖對二者有激活作用，而且激活作用比較顯著；鹽酸胍對二者的激活作用