通心絡(luò)超微粉聯(lián)合津力達(dá)顆粒對(duì)糖尿病大鼠的腎臟防治作用及其對(duì)TGf-β1-Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響.pdf

1、目的:探討通心絡(luò)超微粉聯(lián)合津力達(dá)顆粒對(duì)糖尿病大鼠的腎臟防治作用及其對(duì)TGF-β1/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。
　　方法:采用清潔級(jí)、雄性SD大鼠80只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，隨機(jī)選取10只為正常組（N組，Normal control group），余70只進(jìn)行糖尿病(DM，diabetes)大鼠造模。進(jìn)行造模大鼠給予高脂高糖飼料4周后，按35mg/kg的劑量尾靜脈注射STZ，72小時(shí)后尾靜脈采血測(cè)定空腹血糖，以空腹血糖≥11.1 mm

2、ol/L為DM造模成功。對(duì)成功造模的大鼠進(jìn)行完全隨機(jī)分組:模型組（M組，Model group）、厄貝沙坦組（I組，Irbesartan group）、通心絡(luò)組（T組，Tonxinluo group）、津力達(dá)組（J組，Jinlida group）和通心絡(luò)超微粉加滓力達(dá)組(TCJ組，Tonxinluo combined Jinlida group)各14只。所有藥品溶于5‰的CMC溶液中保持顆?；鞈揖鶆?，M組給予CMC10ml/kg/d，

3、I組給予厄貝沙坦25mg/kg/d，T組給予通心絡(luò)超微粉0.8g/kg/d，J組給予滓力達(dá)顆粒1.5g/kg/d，TCJ組給予（通心絡(luò)超微粉0.8g+津力達(dá)顆粒1.5g）/kg/d，給藥干預(yù)共12周。于第12周末，收集大鼠尿液測(cè)尿微量白蛋白;禁食12h后，10％水合氯醛麻醉，腹主動(dòng)脈取血，離心留取血清，用于測(cè)定各項(xiàng)生化指標(biāo);取左腎稱重后，分別保存于4％甲醛，用于免疫組化指標(biāo)的檢測(cè);右腎保存于液氮中，觀察TGF-β1/Smad信號(hào)通路中s

4、mad2/3與smad7等蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1、一般情況:造模組大鼠較正常組大鼠表現(xiàn)出明顯的多飲、多食、多尿及形體消瘦。
　　2、TGF-β1的蛋白表達(dá)情況:與N組相比，M組中TGF-β1的表達(dá)范圍有所擴(kuò)大，部分?jǐn)U張的腎小管上皮細(xì)胞著色加深;各給藥組中TGF-β1的表達(dá)與M組均有不同程度的減弱，其中TCJ組更接近于N組中的表達(dá)水平。
　　3、FN與CTGF的蛋白表達(dá)情況:M組中FN與CTGF的表達(dá)

5、范圍有所擴(kuò)大，特異性染色也明顯增強(qiáng)，各給藥組中FN與CTGF的表達(dá)較M組均有不同程度的減弱，其中TCJ組更接近于N組中的表達(dá)水平。
　　4、Western Blot檢測(cè)結(jié)果
　　與N組相比較，Smad2/3及p-Smad2/3在M組的表達(dá)明顯增多(P＜0.01)，TCJ組Smad2/3的表達(dá)與N組無(wú)明顯差異(P≥0.05); Smad7蛋白的表達(dá)水平M組、I組、T組、J組、TCJ組顯著降低(分別P＜0.05，P＜0.01);

6、說(shuō)明M組TGF-β1/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被激活。與M組相比，Smad2/3蛋白的表達(dá)水平I組、TCJ組有降低趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);而Smad2/3蛋白磷酸化水平顯著降低(P＜0.05)，其他組無(wú)顯著性差異;Smad7蛋白的表達(dá)水平I組、TCJ組顯著升高(P＜0.01);說(shuō)明I組、TJ組TGF-β1/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活抑制， TCJ組優(yōu)于I組，通心絡(luò)與津力達(dá)聯(lián)用能有效調(diào)控TGF-β1/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。