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文檔簡介
1、目的:通過檢測免疫介導(dǎo)再生障礙性貧血(簡稱再障,AA)小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞中SiSo細(xì)胞表達(dá)的受體結(jié)合腫瘤抗原(receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells,簡稱RCAS1)的含量,了解RCAS1在再障小鼠中的表達(dá)情況;并通過檢測經(jīng)免疫介導(dǎo)再障小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)上清作用后正常小鼠骨髓單個核細(xì)胞(BMMNC)的凋亡、巨噬細(xì)胞株RCAS1的含量以及經(jīng)巨噬細(xì)胞株培養(yǎng)上清作用后正常
2、小鼠BMMNC的凋亡,評價RCAS1mRNA的含量與細(xì)胞凋亡率的相關(guān)性,探討RCAS1在再障發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法:①RT-PCR方法檢測再障小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞株RCAS1的基因表達(dá),正常小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞RCAS1的基因表達(dá)作為正常對照組。②流式細(xì)胞術(shù)檢測分別經(jīng)再障小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞及巨噬細(xì)胞株培養(yǎng)上清作用后正常小鼠BMMNC的凋亡,經(jīng)正常小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)上清作用后正常小鼠BMMNC的凋亡作為正常對照組。③對RCA
3、S1mRNA的含量與細(xì)胞凋亡率的相關(guān)性進(jìn)行分析。 結(jié)果:①再障小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞RCAS1mRNA的表達(dá)強(qiáng)度為(2.17±0.87),正常對照組為(0.96±0.22);巨噬細(xì)胞株RCAS1mRNA的表達(dá)強(qiáng)度為(1.98±0.24),正常對照組為(0.84±0.21);再障組、巨噬細(xì)胞株組明顯高于正常對照組(P<0.01)。②經(jīng)再障小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)上清作用后正常小鼠BMMNC的凋亡率為(8.85±1.05)%明顯高于正常對照組
4、的(2.10±0.25)%(P<0.01):巨噬細(xì)胞株培養(yǎng)上清作用后正常小鼠BMMNC的凋亡率為(16.66±1.97)%明顯高于正常對照組的(2.10±0.25)%(P<0.01)。③再障小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞RCAS1mRNA的表達(dá)強(qiáng)度與經(jīng)再障小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)上清作用后正常小鼠BMMNC的凋亡率呈正相關(guān)(r=0.90,P<0.01)、巨噬細(xì)胞株RCAS1mRNA的表達(dá)強(qiáng)度與經(jīng)巨噬細(xì)胞株培養(yǎng)上清作用后正常小鼠BMMNC的凋亡率呈正相關(guān)(
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