骨髓增生異常綜合征和再生障礙性貧血患者骨髓原始細(xì)胞免疫表型分析.pdf

1、目的：檢測(cè)骨髓增生異常綜合征(MDS)和再生障礙性貧血(AA)患者骨髓原始細(xì)胞免疫表型特征，探討免疫表型對(duì)二者發(fā)病機(jī)制、診斷、分型及鑒別診斷的臨床意義。 方法：采用常規(guī)骨髓穿刺術(shù)，分別抽取23例MDS、14例AA、9例正常對(duì)照者的骨髓各2ml選用多種單克隆抗體(抗體組合分別為CD25/CD34/CD45、HLA-DR/CD3/CD45、CD14/CD13/CD45、CD22/CD33/CD45、CD15/CD7/CD45、CD5

2、/CD19/CD45、CD10/CD20/CD45及IgG1同型對(duì)照)，應(yīng)用直接免疫熒光法采用流式細(xì)胞術(shù)CD45/SSC設(shè)門(mén)法，對(duì)骨髓單個(gè)核細(xì)胞各免疫標(biāo)志的表達(dá)率進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算髓系細(xì)胞分化指數(shù)[DI值，DI=(CD13+CD33)/CD15]，分柝CD34和HLA-DR之間的相關(guān)關(guān)系。 結(jié)果：1、MDS組與正常對(duì)照組比較MDS組骨髓造血干/祖細(xì)胞抗原CD34、HLA-DR、髓系早期抗原CD13、CD33、單核系抗原CD14、T

3、淋巴細(xì)胞抗原CD7的表達(dá)率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，髓系成熟抗原CD15、B淋巴系抗原CD19、CD20的表達(dá)率均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，CD3、CD5、CD25、CD10、CD22的表達(dá)率差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)；髓系細(xì)胞分化指數(shù)(DI值)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。 2、RA組與RAEB組比較RAEB組CD34、HLA-DR、CD13、CD33、CD14、CD7的表達(dá)率均顯著高于RA組(P<0.0

4、5)，CD15、CD3、CD19、CD20的表達(dá)率均顯著低于RA組(P<0.05)，CD5、CD25、CD10、CD22的表達(dá)率差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)；RAEB組的DI值顯著高于RA組(P<0.05)。 3、AA組與正常對(duì)照組比較 AA組CD34、CD13、CD33、CD15的表達(dá)率均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，CD3、CD7、CD25、CD22的表達(dá)率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，HLA-DR、CD14、CD

5、5、CD1O、CD19、CD20的表達(dá)率與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(p>0.05)。 4、MDS組與AA組比較 MDS組CD34、HLA-DR、CD13、CD33、CD14的表達(dá)率均顯著高于AA組(P<0.05)，CD3、CD5、CD7、CD15、CD19、CD20、CD22、CD25的表達(dá)率均顯著低于AA組(P<0.05)，CD10的表達(dá)率無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 5、對(duì)每一組內(nèi)CD34和HLA-DR行相關(guān)分析，R

6、A組、RAEB組、AA組和正下常對(duì)照組的相關(guān)系數(shù)分別為0.909、0.834、0.777和0.755，均為P<0.01，CD34和HLA-DR之間存在顯著正相關(guān)。 結(jié)論：1、MDS組骨髓造血干/祖細(xì)胞標(biāo)志CD34、HLA-DR、髓系早期標(biāo)志CD13、CD33的表達(dá)率高于正常對(duì)照組，提示MDS異常克隆發(fā)生于造血干/祖細(xì)胞，且以髓系干細(xì)胞異常為主。隨疾病進(jìn)展，MDS的惡性克隆逐漸呈現(xiàn)優(yōu)勢(shì)性增長(zhǎng)而對(duì)正常造血產(chǎn)生抑制，使骨髓中以異常的惡

7、性克隆造血細(xì)胞為主；或者隨疾病進(jìn)展，惡性克隆造血細(xì)胞的分化潛力進(jìn)一步下降，表現(xiàn)為RAEB較RA骨髓干/祖細(xì)胞及早期髓系標(biāo)志表達(dá)率增高，而成熟髓系標(biāo)志表達(dá)降低。 2、AA患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞的CD34表達(dá)率低于正常對(duì)照組，CD13、CD33、CD15的表達(dá)率亦降低，而髓系分化指數(shù)無(wú)顯著性變化，提示AA的發(fā)病機(jī)制主要是造血干/祖細(xì)胞減少，而不存在分化障礙；而MDS髓系分化指數(shù)升高，提示其造血干/祖細(xì)胞存在分化障礙，為惡性克隆性干/祖細(xì)

8、胞疾病。 3、本研究引入了髓系分化指數(shù)同時(shí)研究MDS和AA，證實(shí)二者差異具有極顯著性意義，這不僅有助于揭示二者發(fā)病機(jī)制的不同，亦為臨床提供了簡(jiǎn)便、快捷、可靠的診斷及鑒別診斷方法。 4、單核細(xì)胞表面相關(guān)抗原CD14的表達(dá)率較正常對(duì)照增高，提示MDS骨髓單核系存在異常，CD14表達(dá)紊亂。 5、T淋巴系抗原CD3、CD5、CD25在AA組表達(dá)比正常對(duì)照組增高，提示AA患者存在T淋巴細(xì)胞功能亢進(jìn)。 6、B淋巴系抗