剪切波彈性成像技術(shù)定量評(píng)價(jià)兔動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組織成分及易損性的價(jià)值.pdf

1、目的：
　　(1)利用標(biāo)準(zhǔn)模量仿體驗(yàn)證SWE測(cè)量楊氏模量的可重復(fù)性與準(zhǔn)確性
　　(2)利用兔動(dòng)脈粥樣斑塊模型驗(yàn)證SWE識(shí)別斑塊組織成分與易損性的價(jià)值
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型建立
　　20只新西蘭兔，經(jīng)股動(dòng)脈入路，以充盈球囊反復(fù)損傷腹主動(dòng)脈內(nèi)膜3次，給予1％高膽固醇飼料喂養(yǎng)24周建成動(dòng)脈粥樣硬化模型。
　　2.超聲儀器和檢查方法
　　采用Supersonic Imagine Aixplo

2、rer彩色多普勒超聲診斷儀(探頭頻率4-15MHz)的血管成像模式，兩名檢查者分別對(duì)彈性仿體(CIRS)進(jìn)行掃描，并且其中一名檢查者對(duì)彈性仿體重復(fù)測(cè)量一次，計(jì)算觀察者內(nèi)部及觀察者間的測(cè)量變異性，將SWE測(cè)得的模量與標(biāo)準(zhǔn)模量值對(duì)比，研究SWE測(cè)量楊氏模量值的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。
　　采用Supersonic Imagine Aixplorer彩色多普勒超聲診斷儀（探頭頻率4-15MHz），在血管模式下對(duì)兔腹主動(dòng)脈進(jìn)行掃查，以腹主動(dòng)脈斑

3、塊厚度＞1.3mm作為斑塊診斷標(biāo)準(zhǔn)，選取直徑1mm的取樣框，啟動(dòng)SWE，每個(gè)斑塊采集的2-4個(gè)ROI，直接測(cè)斑塊中ROI的平均、最大和最小楊氏模量值，取斑塊中各ROI平均、最大和最小楊氏模量值的平均值來(lái)反應(yīng)斑塊的楊氏模量。掃查時(shí)，均以右腎動(dòng)脈開(kāi)口為參考，記錄每個(gè)斑塊距右腎動(dòng)脈開(kāi)口的長(zhǎng)度，以便取病理標(biāo)本時(shí)對(duì)斑塊進(jìn)行定位。
　　3.取材
　　第24周末，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉成功后開(kāi)腹，分離兔腹主動(dòng)脈全長(zhǎng)，隨后經(jīng)耳緣靜脈注射過(guò)量3％戊巴比

4、妥鈉安樂(lè)死處死動(dòng)物，并立即將灌注針插入右腎動(dòng)脈開(kāi)口水平稍下方的腹主動(dòng)脈腔內(nèi)，下腔靜脈剪小口，用4％多聚甲醛局部灌注固定腹主動(dòng)脈。以右腎動(dòng)脈為參考，根據(jù)記錄的每個(gè)斑塊距離右腎動(dòng)脈的長(zhǎng)度，精確定位取病理標(biāo)本，修剪成2-3mm長(zhǎng)的小塊后，至預(yù)冷的4％多聚甲醛中，4℃下充分固定24-48h。
　　4.常規(guī)病理學(xué)及免疫組織化學(xué)染色
　　將與超聲圖像匹配的粥樣斑塊固定后，分別進(jìn)行石蠟和冰凍組織包埋，以5μm厚度連續(xù)切片，行天狼星紅、油紅

5、O染色、馮.科薩鈣染色和抗α-SMC染色、抗RAM-11免疫組化染色。天狼星紅、油紅O染色顯示斑塊內(nèi)的膠原纖維和脂質(zhì)含量;馮.科薩鈣染色顯示斑塊內(nèi)的鈣成分;免疫組織化學(xué)染色顯示平滑肌成分和巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)。
　　5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　采用SPSS19.0軟件和MedCalc軟件分析。計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用單個(gè)樣本Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)正態(tài)分布

6、，采用Levene檢驗(yàn)評(píng)價(jià)其方差齊性;Bland-Altman Plot分析SWE測(cè)量的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性;采用Pearson雙變量相關(guān)分析楊氏模量值與易損指數(shù)及組織成分間的相關(guān)性;ROC曲線(xiàn)評(píng)價(jià)楊氏模量值對(duì)斑塊類(lèi)型的識(shí)別價(jià)值。
　　結(jié)果：
　　(1)體內(nèi)及體外研究均證實(shí)SWE測(cè)量有較好的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。
　　(2)體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，本研究共獲得脂質(zhì)斑塊10個(gè)，其最大、最小、平均模量值分別為(49.90±22.95)kPa

7、、(29.06±22.90)kPa、(40.15±22.60)kPa;纖維脂質(zhì)斑塊20個(gè)，其最大、最小、平均模量值分別為(88.49±37.27) kPa、(52.33±24.86)kPa、(72.93±29.21)kPa。最大和平均模量值在兩種類(lèi)型斑塊間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，而最小模量值之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。斑塊的平均楊氏模量值與斑塊膠原含量、平滑肌含量和鈣化成分成正相關(guān)(r=0.532，r=0.558，

8、r=0.574 p＜0.05)，與斑塊中的脂質(zhì)含量、巨噬細(xì)胞含量成負(fù)相關(guān)(r=-0.527，r=-0.421，P＜0.05);最大楊氏模量值斑塊膠原含量、平滑肌含量和鈣化成分成正相(r=0.567，r=0.561，r=0.566，p＜0.05)，與斑塊中的脂質(zhì)含量、巨噬細(xì)胞含量成負(fù)相關(guān)（r=-0.543，r=-0.482，P＜0.05）;最小楊氏模量值與斑塊膠原含量、平滑肌含量、鈣化成分含量以及脂質(zhì)含量、巨噬細(xì)胞含量并未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。平均

9、楊氏模量值與斑塊易損指數(shù)成負(fù)相關(guān)（r=-0.619，p＜0.05）;最大楊氏模量值與斑塊易損指數(shù)成負(fù)相關(guān)(r=-0.620，p＜0.05)。
　　(3)斑塊楊氏模量最大值與楊氏模量平均值對(duì)識(shí)別脂質(zhì)及纖維脂質(zhì)斑塊的ROC曲線(xiàn)下面積分別為0.848和0.818(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　(1)SWE測(cè)量有較好的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。
　　(2)SWE測(cè)得的楊氏模量值與斑塊組織成分及易損性有良好的相關(guān)性，對(duì)識(shí)別易損