剪切波彈性成像技術定量評價兔動脈粥樣硬化斑塊組織成分及易損性的價值.pdf

1、目的：
　　(1)利用標準模量仿體驗證SWE測量楊氏模量的可重復性與準確性
　　(2)利用兔動脈粥樣斑塊模型驗證SWE識別斑塊組織成分與易損性的價值
　　方法：
　　1.實驗動物模型建立
　　20只新西蘭兔，經股動脈入路，以充盈球囊反復損傷腹主動脈內膜3次，給予1％高膽固醇飼料喂養(yǎng)24周建成動脈粥樣硬化模型。
　　2.超聲儀器和檢查方法
　　采用Supersonic Imagine Aixplo

2、rer彩色多普勒超聲診斷儀(探頭頻率4-15MHz)的血管成像模式，兩名檢查者分別對彈性仿體(CIRS)進行掃描，并且其中一名檢查者對彈性仿體重復測量一次，計算觀察者內部及觀察者間的測量變異性，將SWE測得的模量與標準模量值對比，研究SWE測量楊氏模量值的準確性與可重復性。
　　采用Supersonic Imagine Aixplorer彩色多普勒超聲診斷儀（探頭頻率4-15MHz），在血管模式下對兔腹主動脈進行掃查，以腹主動脈斑

3、塊厚度＞1.3mm作為斑塊診斷標準，選取直徑1mm的取樣框，啟動SWE，每個斑塊采集的2-4個ROI，直接測斑塊中ROI的平均、最大和最小楊氏模量值，取斑塊中各ROI平均、最大和最小楊氏模量值的平均值來反應斑塊的楊氏模量。掃查時，均以右腎動脈開口為參考，記錄每個斑塊距右腎動脈開口的長度，以便取病理標本時對斑塊進行定位。
　　3.取材
　　第24周末，實驗動物麻醉成功后開腹，分離兔腹主動脈全長，隨后經耳緣靜脈注射過量3％戊巴比

4、妥鈉安樂死處死動物，并立即將灌注針插入右腎動脈開口水平稍下方的腹主動脈腔內，下腔靜脈剪小口，用4％多聚甲醛局部灌注固定腹主動脈。以右腎動脈為參考，根據(jù)記錄的每個斑塊距離右腎動脈的長度，精確定位取病理標本，修剪成2-3mm長的小塊后，至預冷的4％多聚甲醛中，4℃下充分固定24-48h。
　　4.常規(guī)病理學及免疫組織化學染色
　　將與超聲圖像匹配的粥樣斑塊固定后，分別進行石蠟和冰凍組織包埋，以5μm厚度連續(xù)切片，行天狼星紅、油紅

5、O染色、馮.科薩鈣染色和抗α-SMC染色、抗RAM-11免疫組化染色。天狼星紅、油紅O染色顯示斑塊內的膠原纖維和脂質含量;馮.科薩鈣染色顯示斑塊內的鈣成分;免疫組織化學染色顯示平滑肌成分和巨噬細胞的浸潤。
　　5.統(tǒng)計學處理
　　采用SPSS19.0軟件和MedCalc軟件分析。計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(mean±SD)表示。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。采用單個樣本Kolmogorov-Smirnov檢驗評價數(shù)據(jù)正態(tài)分布

6、，采用Levene檢驗評價其方差齊性;Bland-Altman Plot分析SWE測量的可重復性和準確性;采用Pearson雙變量相關分析楊氏模量值與易損指數(shù)及組織成分間的相關性;ROC曲線評價楊氏模量值對斑塊類型的識別價值。
　　結果：
　　(1)體內及體外研究均證實SWE測量有較好的可重復性和準確性。
　　(2)體內研究發(fā)現(xiàn)，本研究共獲得脂質斑塊10個，其最大、最小、平均模量值分別為(49.90±22.95)kPa

7、、(29.06±22.90)kPa、(40.15±22.60)kPa;纖維脂質斑塊20個，其最大、最小、平均模量值分別為(88.49±37.27) kPa、(52.33±24.86)kPa、(72.93±29.21)kPa。最大和平均模量值在兩種類型斑塊間的差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)，而最小模量值之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。斑塊的平均楊氏模量值與斑塊膠原含量、平滑肌含量和鈣化成分成正相關(r=0.532，r=0.558，

8、r=0.574 p＜0.05)，與斑塊中的脂質含量、巨噬細胞含量成負相關(r=-0.527，r=-0.421，P＜0.05);最大楊氏模量值斑塊膠原含量、平滑肌含量和鈣化成分成正相(r=0.567，r=0.561，r=0.566，p＜0.05)，與斑塊中的脂質含量、巨噬細胞含量成負相關（r=-0.543，r=-0.482，P＜0.05）;最小楊氏模量值與斑塊膠原含量、平滑肌含量、鈣化成分含量以及脂質含量、巨噬細胞含量并未發(fā)現(xiàn)相關性。平均

9、楊氏模量值與斑塊易損指數(shù)成負相關（r=-0.619，p＜0.05）;最大楊氏模量值與斑塊易損指數(shù)成負相關(r=-0.620，p＜0.05)。
　　(3)斑塊楊氏模量最大值與楊氏模量平均值對識別脂質及纖維脂質斑塊的ROC曲線下面積分別為0.848和0.818(P＜0.05)。
　　結論：
　　(1)SWE測量有較好的可重復性和準確性。
　　(2)SWE測得的楊氏模量值與斑塊組織成分及易損性有良好的相關性，對識別易損