IL-24-Bax融合分子及其受體誘導(dǎo)肝癌細胞凋亡的初步研究.pdf

1、目的：檢測人肝癌細胞株和正常人肝細胞株IL-24受體表達譜，初步探討IL-24-Bax融合分子對肝癌細胞的凋亡誘導(dǎo)作用。 方法：應(yīng)用細胞免疫化學(xué)方法檢測人肝癌細胞株(BEL-7402、HepG2、Huh-7、PLC/PRF/5、QGY-7701、SMMC-7721)和正常人肝細胞株(L02)3個IL-24受體亞基(IL-20R1、IL-20R2、IL-22R)表達情況。應(yīng)用分子克隆技術(shù)重組由IL-24cDNA和BaxαcDNA組

2、成的融合基因IL-24-Bax，構(gòu)建表達載體pcDNA3.1-IL-24和pcDNA3.1-IL-24-Bax，瞬時轉(zhuǎn)染PLC/PRF/5細胞，用活細胞計數(shù)法和TUNEL法比較二者對靶細胞生長和凋亡的效應(yīng)。 結(jié)果：除PLC/PRF/5細胞全部表達3個受體亞基外，其他受檢細胞(包括肝細胞)均只表達IL-20R2和IL-22R。pcDNA3.1-IL-24和pcDNA3.1-IL-24-Bax瞬時轉(zhuǎn)染PLC/PRF/5后，Weste

3、rnblot可檢測到目的蛋白表達，細胞免疫化學(xué)染色顯示其定位于細胞質(zhì)。與空白組和空載體組相比，IL-24及IL-24-Bax可顯著抑制人肝癌細胞株生長增殖(P＜0.05)，并顯著增加肝癌細胞的凋亡百分率(P＜0.05)，且后者的作用強于前者(P＜0.05)。 結(jié)論：不同的肝癌細胞具有不同的IL-24受體表達譜，正常肝細胞甚至具有與肝癌細胞相同的IL-24受體表達譜。IL-24選擇性誘導(dǎo)肝癌細胞凋亡的作用可能不通過已知的受體介導(dǎo)。I