微型鼠的骨密度分析及其突變基因的初步定位.pdf

1、為進(jìn)一步研究基因突變與侏儒癥的關(guān)系，利用化學(xué)物質(zhì)乙基亞硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea，ENU)人工誘變了BALB/c小鼠，經(jīng)傳代產(chǎn)生了一種侏儒癥形態(tài)的小鼠，并命名這種變異小鼠為微型鼠(SmallBodySizemouse，SBS)。經(jīng)遺傳分析發(fā)現(xiàn)微型鼠表現(xiàn)常染色體隱性遺傳特性。微型鼠在出生1日齡時(shí)，其形態(tài)與正常BALB/c小鼠肉眼不易區(qū)分，但其體重與正常BALB/c小鼠比較差異顯著。1周齡后的微型鼠經(jīng)肉眼觀察其形態(tài)可

2、與正常BALB/c小鼠區(qū)分，并且體重差異更加顯著。本試驗(yàn)不但檢測(cè)了微型鼠的體重及骨密度變化，而且利用微衛(wèi)星遺傳標(biāo)記通過(guò)遺傳連鎖分析對(duì)突變基因進(jìn)行了初步定位。試驗(yàn)中隨機(jī)選擇了30只微型鼠和24只正常BALB/c小鼠，從出生到14周齡進(jìn)行長(zhǎng)期的觀察并記錄體重變化；并且另外隨機(jī)選擇了5只微型鼠和5只正常小鼠，分別在3周齡和6周齡進(jìn)行骨密度檢測(cè)。為了實(shí)現(xiàn)對(duì)突變基因的初步定位，本研究首先利用回交試驗(yàn)法培育出了142只回交后代[(SBS×C57BL

3、/6J)F1×SBS]F2，再次通過(guò)PCR法對(duì)19條常染色體上的79個(gè)微衛(wèi)星遺傳標(biāo)記進(jìn)行詳細(xì)的篩選，從而完成遺傳連鎖分析。試驗(yàn)結(jié)果表明，從出生到14周齡微型鼠的體重顯著低于同齡的正常BALB/c小鼠的體重，尤其在3周齡時(shí)其體重是正常BALB/c小鼠體重的43.7％，差異極顯著(P＜0.001)。在骨密度檢測(cè)的結(jié)果中，本研究發(fā)現(xiàn)微型鼠在3周齡和6周齡時(shí)的骨密度都明顯低于同齡正常BALB/c小鼠的。遺傳連鎖分析結(jié)果表明，突變基因(sbs)初