遺傳性白內(nèi)障致病基因的定位及其突變分析.pdf

1、本文利用等位基因共享分析與定位候選克隆策略，對多個臨床表現(xiàn)類型不同的遺傳性白內(nèi)障大家系致病基因進行定位與突變分析。 1.對傳遞6代的珊瑚型/核性白內(nèi)障家系進行連鎖分析，結(jié)果顯示：微衛(wèi)星分子標記D2S325和D2S1782與致病基因緊密連鎖，檢測到γD晶體蛋白基因(GammacrystallinD，CRYGD)第43位堿基由C突變成T，結(jié)果使14號氨基酸殘基由Arg突變成Cys(R14C)；利用病理學(xué)方法對白內(nèi)障組織進行了觀察與分

2、析，發(fā)現(xiàn)核性白內(nèi)障患者的晶狀體核與皮質(zhì)都有病理學(xué)改變；本研究首次發(fā)現(xiàn)攜帶CRYGD的R14C基因突變的白內(nèi)障患者臨床表現(xiàn)有異質(zhì)性，并且首次在中國人群中檢測到該突變。 2.對傳遞5代的完全白內(nèi)障家系進行連鎖分析，結(jié)果顯示：微衛(wèi)星分子標記D12S90與致病基因緊密連鎖，檢測到晶狀體主要內(nèi)源性蛋白基因(majorintrinsicprotein，MIP)第97位堿基由C突變成T，結(jié)果使33號氨基酸殘基由Arg突變成Cys(R33C)；

3、本研究首次發(fā)現(xiàn)MIP跨膜區(qū)以外的基因突變可以導(dǎo)致人類白內(nèi)障。 3.對傳遞5代的完全/核性/點狀白內(nèi)障家系進行連鎖分析，結(jié)果顯示：微衛(wèi)星分子標記D21S1411與致病基因緊密連鎖；檢測到α-A晶體蛋白基因(alphaA-crystallin，CRYAA)第414位堿基由G突變成A，結(jié)果使116號氨基酸殘基由Arg突變成His(R116H)；本研究首次發(fā)現(xiàn)CRYAA的R116H突變可以導(dǎo)致人類白內(nèi)障，并且首次發(fā)現(xiàn)攜帶該突變的家族患者

4、臨床表現(xiàn)有異質(zhì)性。 4.對兩個分別表現(xiàn)為特殊表型白內(nèi)障和核性白內(nèi)障的家系進行等位基因共享分析，排除了已知白內(nèi)障致病基因和兩個重要候選基因是導(dǎo)致這兩個家系產(chǎn)生白內(nèi)障的原因，該研究為找到導(dǎo)致這兩個家系白內(nèi)障的致病基因縮小了范圍。 5.首次完成了R116H突變型CRYAA基因的原核表達；同時完成了野性型及R49C，R116C突變型CRYAA基因的原核表達；獲得了MIP野生型編碼序列。該部分研究為闡明這兩個基因的突變所致白內(nèi)障的