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1、目的:通過(guò)觀察不同程度快速眼動(dòng)(REM)期睡眠剝奪和恢復(fù)及中樞性興奮藥莫達(dá)非尼(modafinil)干預(yù)后大鼠大鼠認(rèn)知功能和海馬突觸可塑性變化,探討REM期睡眠剝奪引起認(rèn)知功能下降的機(jī)制及改善方法。 方法:成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為REM期睡眠剝奪組、空白對(duì)照組(CC)和環(huán)境對(duì)照組(TC),REM睡眠剝奪組又分非藥物空白對(duì)照組(control Group,CG),助溶劑CMC組(CMC),modafinil干預(yù)組(modafini
2、l),每組分為剝奪1天(SD1d)、SD3d、SD5d、恢復(fù)睡眠6h(RS6h)和RS12h,共5個(gè)時(shí)間點(diǎn);采用改良多平臺(tái)水環(huán)境REM期睡眠剝奪法(MMPM)進(jìn)行REM期睡眠剝奪,利用Y迷宮測(cè)定大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力,運(yùn)用蛋白質(zhì)免疫印記(Western Blot)技術(shù)對(duì)大鼠海馬synapsin Ⅰ蛋白作選擇性半定量分析,運(yùn)用免疫組織化學(xué)(IHC)的方法分析大鼠海馬CA3區(qū)突觸素Synapsin Ⅰ的表達(dá),同時(shí)應(yīng)用電鏡技術(shù)觀察海馬CA3區(qū)輻
3、射層突觸的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,觀察突觸可塑性。 結(jié)果:CC組與TC組的EN及TRT均無(wú)明顯差別(p>0.05),與CC比較CG組大鼠EN在SD3d、SD5d時(shí)明顯增加(p<0.05),TRT無(wú)變化(p>0.05),在SD1d、SD3d、SD5d時(shí)modafinil組與CG組比較EN減少(p<0.05),TRT無(wú)差別。免疫組化結(jié)果顯示與CC組比較各睡眠剝奪時(shí)間點(diǎn)海馬CA3區(qū)synapsin Ⅰ表達(dá)均減少(p<0.05),在SD1d、SD
4、3d和RS6h、RS12h各時(shí)間點(diǎn),modafinil組synapsin Ⅰ表達(dá)比CG組增加(p<0.05),Western Blot結(jié)果與之一致。電鏡下觀察SD1d時(shí),未用藥大鼠突觸前膜囊泡數(shù)量減少,活性區(qū)長(zhǎng)度減小,突觸后致密物變薄,modafinil干預(yù)后突觸前膜囊泡數(shù)量增加,活性區(qū)增長(zhǎng),突觸后致密物增厚。 結(jié)論:不同程度的REM期睡眠剝奪均會(huì)對(duì)認(rèn)知功能下降,引起大鼠海馬CA3區(qū)synapsin Ⅰ表達(dá)變化,而莫達(dá)非尼可以使
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