幾種手性藥物的高效液相色譜法拆分及大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究.pdf

1、手性藥物對(duì)映體的藥理活性和毒副作用可能不同，目前新藥研究的一個(gè)發(fā)展趨勢(shì)是研制和生產(chǎn)具有光學(xué)純度的藥物。因此建立快速、準(zhǔn)確、高效的手性藥物拆分方法，對(duì)于研究對(duì)映體的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過(guò)程、藥理和毒理作用機(jī)制以及質(zhì)量控制都具有十分重要的意義。
　　本文應(yīng)用正相高效液相色譜法分離了手性藥物吡格列酮及二硫代氨基甲酸酯、丁烯內(nèi)酯、新型吲哚等三大類(lèi)手性化合物對(duì)映體，探討了拆分機(jī)理;測(cè)定了二硫代氨基甲酸酯類(lèi)化合物的體外抗腫瘤和抑菌活性，并考察了其對(duì)映體

2、的活性差異;建立了吡格列酮對(duì)映體的含量測(cè)定方法，首次對(duì)吡格列酮兩對(duì)映體在雌雄兩組大鼠體內(nèi)的立體選擇性藥物動(dòng)力學(xué)過(guò)程進(jìn)行了研究和比較，本課題主要研究?jī)?nèi)容包括以下幾方面。
　　一、手性藥物吡格列酮的拆分及其對(duì)映體的含量測(cè)定
　　采用正相高效液相色譜法，纖維素類(lèi)鍵合型ChiralPak IC柱，對(duì)吡格列酮對(duì)映體進(jìn)行了拆分研究，系統(tǒng)考察了流動(dòng)相組成、堿性添加劑、柱溫及流速對(duì)其拆分的影響。在優(yōu)化的色譜條件下，吡格列酮對(duì)映體獲得了較好的

3、分離，對(duì)吡格列酮對(duì)映體的手性分離進(jìn)行了方法學(xué)考察，兩對(duì)映體的濃度在0.50～100μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線(xiàn)性關(guān)系(r2=0.9999)，最低檢測(cè)限和定量限分別為0.15和0.50μg/mL，方法的日內(nèi)、日間精密度(RSD)均小于6.70％，平均加樣回收率在97.3～110.8％之間，該方法可用于吡格列酮對(duì)映體的含量測(cè)定;此外，對(duì)拆分機(jī)理進(jìn)行了初步探討。
　　二、大鼠血漿中吡格列酮對(duì)映體的藥動(dòng)學(xué)研究
　　建立了測(cè)定大鼠

4、血漿中吡格列酮對(duì)映體的手性色譜方法。研究了大鼠單劑量灌胃給藥后兩對(duì)映體在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程。結(jié)果表明，在雌雄兩組大鼠血漿中后出峰的構(gòu)型2的濃度始終高于先出峰的構(gòu)型1的，且構(gòu)型2的Cmax、AUC0-24、AUC0-x值均分別約是構(gòu)型1的兩倍。兩對(duì)映體的CL/F、Cmax、AUC0-24和AUC0-x均具有顯著性差異(P＜0.05)，表明吡格列酮在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)具有立體選擇性;兩對(duì)映體在雌鼠體內(nèi)的Cmax分別是雄鼠的1.7倍和2.

5、2倍，AUC0-24值分別是雄鼠的1.8和2.3倍，表明吡格列酮兩對(duì)映體在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)具有性別差異。
　　三、二硫代氨基甲酸酯類(lèi)化合物的拆分及活性研究
　　采用正相高效液相色譜法，纖維素類(lèi)鍵合型Chiralpak IC柱，對(duì)二硫代氨基甲酸酯類(lèi)化合物進(jìn)行了拆分研究，系統(tǒng)考察了流動(dòng)相組成、流速和溫度對(duì)分離的影響。三種化合物均獲得了較好的分離。采用MTT法測(cè)定了三種化合物及化合物A兩對(duì)映的體外抗腫瘤和抑菌活性。左旋體對(duì)腫瘤

6、細(xì)胞MCF-7和MGC-803的細(xì)胞毒作用約是右旋體的2倍，右旋體對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、嗜麥假單胞菌的抑制作用約為左旋體的2倍，表明兩對(duì)映體的細(xì)胞毒和抑菌作用存在立體選擇性。
　　四、丁烯內(nèi)酯和新型吲哚類(lèi)手性化合物的拆分
　　采用正相高效液相色譜法，纖維素類(lèi)鍵合型Chiralpak IC柱，對(duì)丁烯內(nèi)酯和新型吲哚兩類(lèi)化合物進(jìn)行了拆分研究。系統(tǒng)考察了流動(dòng)相組成、流速和溫度對(duì)分離的影響，并探討了拆分機(jī)理。六種丁烯內(nèi)酯類(lèi)化合物