溶髓方對椎間盤軟骨終板細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:研究溶髓方在防治椎間盤軟骨終板退變的作用機(jī)理。
　　 方法:選取健康Wistar大白鼠36只，隨機(jī)分為空白對照組、病理模型組和實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組和病理模型組采用手術(shù)造模方式建立動物模型，即沿大鼠C1-C7棘突做后正中切口，剝離椎旁肌肉，切除C1-C7的棘上、棘間韌帶及兩側(cè)關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)后外1/2，誘發(fā)椎間盤加速退變;空白對照組做假手術(shù)，切開皮膚之后縫合。術(shù)后1周開始灌胃，實(shí)驗(yàn)組給溶髓方湯劑，病理模型組和空白對照組分別給生理鹽水，每

2、日一次，灌1個月，分別于手術(shù)后第10周、18周、36周對三組動物分別實(shí)施過度麻醉處死，完整取下包含上下椎體的椎間盤。對取下的頸椎標(biāo)本做矢狀位切片，小心分離軟骨終板和椎間盤。按Thompson椎間盤退變病理分級標(biāo)準(zhǔn)[1]對頸椎間盤進(jìn)行分級評定。將軟骨終板石蠟包埋，切片。做HE染色和Tunnel染色，計數(shù)椎間盤軟骨終板細(xì)胞凋亡數(shù)量，評估軟骨終板退變狀況。
　　 結(jié)果:(1)椎間盤退變的組織學(xué)表現(xiàn)。10周時，空白對照組大鼠椎間盤組織結(jié)

3、構(gòu)基本正常。而病理模型組和實(shí)驗(yàn)組大鼠椎間盤均出現(xiàn)輕度退變表現(xiàn)，差別不明顯。18周后空白組大鼠椎間盤出現(xiàn)輕微退變，但不明顯，髓核皺縮，纖維環(huán)出現(xiàn)裂隙。病理模型組大鼠椎間盤退變明顯，實(shí)驗(yàn)組大鼠椎間盤退變有所恢復(fù)，組織結(jié)構(gòu)基本正常，與空白組無明顯差異。36周后，空白對照組大鼠頸椎間盤與18周相比出現(xiàn)顯著退變，且與病理模型組差異不大，而實(shí)驗(yàn)組椎間盤有輕度退變。(2)HE染色觀察頸椎間盤細(xì)胞凋亡狀況。術(shù)后10周病理模型組和實(shí)驗(yàn)組終板結(jié)構(gòu)都出現(xiàn)局部

4、消失，細(xì)胞密度降低，可見散在分布的凋亡軟骨細(xì)胞和凋亡小體。術(shù)后18周病理模型組出現(xiàn)顯著退變，實(shí)驗(yàn)組退變有所恢復(fù)，術(shù)后36周空白對照組和病理模型組退變均比較明顯，椎間盤完全鈣化，終板基本消失，實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)輕度退變。(3)TUNEL染色比較各組軟骨終板內(nèi)細(xì)胞凋亡率（TUNEL陽性細(xì)胞率）。軟骨終板內(nèi)的細(xì)胞凋亡主要發(fā)生在18周以后，在試驗(yàn)中我們可以發(fā)現(xiàn)，10周時，空白對照組、病理模型組和實(shí)驗(yàn)組軟骨終板內(nèi)凋亡細(xì)胞幾乎均不可見。而18周時這種情況就