SIRT1調(diào)控凋亡對人退變終板軟骨細胞的影響.pdf

1、目的：探討人退變終板軟骨(cartilage endplate，CEP)中凋亡和沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源物1（ silent information regulation2 homolog-1，SIRT1）的表達情況，探討 SIRT1是否可以抑制退變 CEP細胞的凋亡。
　　方法： CEP取材于重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腰椎間盤突出（ lumbar disc herniation，LDH）和腰椎骨折(lumbar vertebrae

2、fracture, LVF)的手術(shù)患者(時間從2014年6月到2015年5月），用Pfirrmann分級評價人椎間盤退變程度。HE染色觀察正常和退變CEP的細胞形態(tài)和細胞數(shù)量，免疫組織化學(xué)觀察正常和退變CEP中SIRT1，caspase3，Ⅱ型膠原的表達。單層培養(yǎng)CEP細胞，取p2代CEP細胞完成實驗。細胞經(jīng)過白藜蘆醇和 SIRT1干擾 RNA或尼克酰胺處理后，westernblot檢測SIRT1、Bcl-2和caspase3的表達，流

3、式細胞學(xué)檢測細胞凋亡率。
　　結(jié)果：HE染色結(jié)果表明終板組織細胞為類圓形軟骨細胞類型，退變CEP細胞數(shù)量減少。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，退變CEP中SIRT1和Ⅱ型膠原的表達下降，凋亡相關(guān)因子 caspase-3的表達上升。白藜蘆醇處理CEP細胞后SIRT1和Bcl2的表達上升，凋亡相關(guān)蛋白caspase-3的蛋白表達下降，細胞凋亡率下降；經(jīng)SIRT1干擾RNA或尼克酰胺處理后SIRT1和Bcl2的表達下降，caspase3表達上升，