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1、目的:鈣化性主動(dòng)脈瓣疾病(CAVD)已經(jīng)成為主動(dòng)脈瓣狹窄(AS)及瓣膜置換的首要病因,目前其病理機(jī)制較明確,但該病的分子機(jī)制仍不清楚。本研究探討Wnt信號(hào)通路是否參與血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的主動(dòng)脈瓣鈣化。
方法:進(jìn)行家兔主動(dòng)脈瓣的瓣膜間質(zhì)細(xì)胞分離和培養(yǎng)。用血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、纈沙坦及其共同干預(yù)培養(yǎng)的瓣膜間質(zhì)細(xì)胞,采用Western Blotting技術(shù)和RT-PCR技術(shù)分析瓣膜間質(zhì)細(xì)胞分泌的BMP2,ALP蛋白及和其相應(yīng)的基因
2、表達(dá)水平,同時(shí)檢測(cè)Wnt信號(hào)通路的關(guān)鍵調(diào)控蛋白GSK-3β和β-catenin及相應(yīng)基因表達(dá)水平。
結(jié)果:經(jīng)48小時(shí)作用,我們發(fā)現(xiàn)①血管緊張素Ⅱ干預(yù)組的瓣膜間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的促鈣化蛋白BMP2和ALP較對(duì)照組明顯增加;②纈沙坦干預(yù)組的瓣膜間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)BMP2和ALP較對(duì)照組有下降趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;③在AngⅡ和纈沙坦共同作用組BMP2和ALP較對(duì)照組無(wú)顯著變化,但與血管緊張素Ⅱ干預(yù)組相比有明顯下降;④發(fā)現(xiàn)GSK-3β和β-ca
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