脈沖電磁場對糖尿病大鼠急性下肢缺血血管再生作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：
　　糖尿病導(dǎo)致的下肢缺血是缺血性疾病中的常見癥狀，具有發(fā)生率高、致殘率高及病死率高等特點(diǎn)，嚴(yán)重的影響人們的生活質(zhì)量，成為社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的沉重負(fù)擔(dān)。對于缺血性疾病，治療性血管性新生是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。治療性血管新生主要包括包括干細(xì)胞移植、直接注射重組成血管因子的蛋白療法和基于傳遞編碼成血管因子基因的基因療法。這些方法在缺血性疾病中取得了一定的療效,但是其價(jià)格昂貴,技術(shù)要求高,對具有龐大患病人群但醫(yī)療資源相對十分缺乏的我國難以

2、普遍推廣。隨著脈沖電磁場的發(fā)展,在臨床中廣泛應(yīng)用于促進(jìn)骨愈合、治療腫瘤和一些神經(jīng)損傷性疾病,取得了較好的療效，在實(shí)驗(yàn)研究方面，已發(fā)現(xiàn)脈沖電磁場可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、加快血管化的作用，因此，本實(shí)驗(yàn)研究脈沖電磁場對糖尿病大鼠急性缺血下肢血管再生的影響。
　　研究目的：
　　1.建立糖尿病大鼠急性下肢缺血模型，對實(shí)驗(yàn)組大鼠給予脈沖電磁場處照組（P<0.05），而術(shù)后當(dāng)天及術(shù)后7天，實(shí)驗(yàn)組與對照組的血流恢復(fù)無明顯差異（P＞0.05）。

3、
　　2.免疫組化染色結(jié)果顯示：術(shù)后7、14、28天，實(shí)驗(yàn)組CD31的表達(dá)分別為430.2±18.15/mm2，677.4±15.63/mm2，837.2±25.60/mm2；而對照組為357.8±26.64/mm2，495.2±25.31/mm2，619.4±19.24/mm2。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后14、28天明顯高于對照組（P<0.05），而術(shù)后7天兩組無顯著性差異（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)組α-SMA的表達(dá)在7、14、28天分別為22.6

4、±1.91/mm2，35.8±2.08/mm2和50.6±3.08/mm2；對照組為18.2±1.07/mm2，25.6±1.94/mm2和32.4±1.72/mm2，兩組α-SMA的表達(dá)對比結(jié)果與CD31一致。
　　3.免疫熒光染色可見:術(shù)后7、14、28天，實(shí)驗(yàn)組RECA-1表達(dá)分別為：96.4±4.00/mm2，179.8±6.95/mm2，253.0±8.67/mm2；對照組為89.6±4.51/mm2，150.4±5.3

5、5/mm2，184.6±6.09/mm2；實(shí)驗(yàn)組在14、28天時(shí)明顯高于對照組（P<0.05）；而7天時(shí)兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　4.VEGF、FGF-2及其受體檢測結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組7、14、28天等不同時(shí)間點(diǎn)VEGF的ELISA檢測值分別為38.6±6.27pg/ml，91.4±10.51pg/ml，59.8±6.48pg/ml；對照組為40.4±5.83pg/ml，80.4±10.88pg/ml，51.6±2.9

6、0pg/ml；兩組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），Western blot的結(jié)果與ELISA一致。實(shí)驗(yàn)組FGF-2的ELISA檢測值在各個(gè)時(shí)間段內(nèi)分別為13.4±1.91pg/ml，28.4±3.67pg/ml，47.4±6.80pg/ml；對照組分別為：7.6±1.21pg/ml，11.8±1.53pg/ml，10.8±2.17pg/ml，在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組明顯高于對照組（P<0.05），Western的結(jié)果與之一致。同時(shí)Wes

7、tern對VEGF受體VEGFR2檢測，未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而對FGF-2受體FGFR1檢測，我們發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組在各個(gè)階段明顯高于對照組（P<0.05）。
　　5.P-ERK1/2、T-ERK1/2、P-P38、T-P38檢測結(jié)果通過Western blot方法檢查，實(shí)驗(yàn)組P-ERK1/2與T-ERK1/2比值在各個(gè)時(shí)間段均高于對照組（P<0.05）,而兩組P-P38與T-P38比值無顯著性差異(P>0.05)。