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文檔簡介
1、目的:
建立糖尿病大鼠下肢缺血動物模型,采用尾靜脈注射轉染小凹蛋白(Caveolin-1)質粒,觀察其缺血肌肉組織中血管生成情況,研究Caveolin-1在糖尿病大鼠下肢缺血部位中對血管生成的作用以及與AKT信號通路的關系。
方法:
從南華大學動物實驗部購買健康、雄性、SD大鼠,腹腔注射鏈脲菌素(STZ)構建糖尿病大鼠模型,離斷左側股動脈及其分支建立急性下肢缺血動物模型,根據(jù)實驗設計隨機分為3組(每組10只
2、):①假手術組、②缺血組、③糖尿病組,于缺血術后第14天收集各組缺血下肢的腓腸肌肌肉組織,用 Western-Blot測定Caveolin-1的表達情況;同樣根據(jù)實驗設計,運用脂質體轉染Caveolin-1質粒技術,隨機分為4組(每組20只):①假手術組、②缺血組、③轉染組、④空轉染組,于缺血術后第14天取各組10只缺血下肢的腓腸肌肌肉組織,用Western-Blot檢測Caveolin-1、AKT的表達情況,其余大鼠于術后第28天取缺
3、血下肢腓腸肌肉組織行CD34免疫組織化學染色和HE染色,評價血管密度。
結果:
用Western-Blot檢測各組Caveolin-1蛋白的表達情況顯示:缺血組和糖尿病組Caveolin-1蛋白的表達較假手術組明顯增多(P<0.05),而糖尿病組 Caveolin-1蛋白的表達較缺血組明顯低(P<0.05);轉染組比假手術組、缺血組、空轉染組的Caveolin-1、AKT蛋白的表達明顯增多(P<0.05),表明轉染成
4、功。同時通過 HE染色以及CD34免疫組織化學染色分別觀察腓腸肌肌肉組織中微血管/肌纖維束的比值和微血管密度(MVD)時顯示:缺血組、空轉染組與假手術組比較時,微血管均有增多,但不如轉染組中微血管密度增加顯著(P<0.05),這說明Caveolin-1過表達后對糖尿病大鼠下肢缺血部位的血管生成有明顯的促進作用,同時提示這可能與激活AKT有關。
結論:
1、Caveolin-1過表達對糖尿病大鼠下肢缺血部位的血管生成有
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