脂氧素A4在口腔扁平苔蘚NF-κBp65信號通路中的作用研究.pdf

1、目的：
　　本課題通過研究脂氧素A4受體（ALX-R）及核因子-kBp65(NF-κBp65)在口腔扁平苔蘚（oral lichen planus，OLP）病灶和正?？谇火つぃ╪omal oral mucosa， NOM）中的表達情況，以及不同濃度脂氧素A4類似物15-epi-LXA4對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)角質(zhì)形成細胞(HaCaT細胞)所模擬的OLP炎癥模型的影響，探討LXA4對口腔扁平苔蘚的可能作用機制。
　　方法：

2、>　　第一部分：（1）獲取OLP及NOM組織，切片并HE染色，選取符合標準的標本。（2）SP免疫組化法檢測ALX-R、NF-κBp65在OLP組織和NOM組織中的表達情況，并比較所測指標在兩種組織中的表達差異及其相關(guān)關(guān)系。
　　第二部分：（1）采用10μg/mL的LPS刺激HaCaT細胞，一定程度上模擬OLP局部免疫應(yīng)答環(huán)境，ELISA法觀察LPS作用時間長度分別為6、12、24h，所構(gòu)建的OLP細胞模型中免疫應(yīng)答產(chǎn)物IL-6的表

3、達狀況；（2）運用50、100、200nmol/L的15-epi-LXA4干預(yù)處理所建立的OLP細胞模型，分別于6、12、24小時提取細胞培養(yǎng)上清和總RNA，檢測分析15-epi-LXA4對OLP細胞模型IL-6分泌和NF-κBp65基因表達的影響。
　　結(jié)果：
　　第一部分：（1）ALX-R蛋白在OLP和NOM中表達陽性率分別為43.3％、90%，兩者具有顯著性差異(P＜0.05)；（2）NF-kBp65蛋白在OLP組及N

4、OM中表達強度分別為83.3%、20%，兩者具有顯著性差異(P<0.01)，其中糜爛萎縮型高于網(wǎng)紋型組(P<0.05)；（3）OLP和NOM中NF-κBp65表達水平與ALX-R表達水平呈負相關(guān)。
　　第二部分：（1）體外OLP炎癥模型中，免疫應(yīng)答產(chǎn)物IL-6表達量明顯增加，且表達量隨著時間的增加呈上升趨勢；（2）一定濃度的15-epi-LXA4能夠抑制NF-κBp65和IL-6的表達，200nmol/L的15-epi-LXA4對

5、NF-κBp65和IL-6抑制效果最顯著(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、ALX-R在NOM中強表達，而在OLP中弱陽性表達，且其表達與NF-κBp65呈負相關(guān)，提示ALX-R表達缺陷可能與OLP的轉(zhuǎn)歸有一定關(guān)系；
　　2、不同臨床類型OLP的ALX-R表達無顯著性差異，而NF-κBp65的表達有差異，糜爛萎縮型高于網(wǎng)紋型組，可能與NF-κBp65介導(dǎo)大量炎癥因子的表達有關(guān)，這與臨床中糜爛型OLP炎癥更嚴重相符合