羥氯喹對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)庵苎獑蝹€(gè)核細(xì)胞凋亡及Th17影響的研究.pdf

1、背景：
　　 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，SLE)是一種慢性、多系統(tǒng)受累的，嚴(yán)重危害人類健康的自身免疫性疾病，全國(guó)患病總?cè)藬?shù)高達(dá)100萬(wàn)。迄今為止，其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚。目前主要治療方案是糖皮質(zhì)激素聯(lián)合多種藥物如環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤，來氟米特等。羥氯喹廣泛應(yīng)用于SLE治療，取得了一定療效，在風(fēng)濕病治療中的作用愈來愈受到重視。但其確切的治療機(jī)制尚不完全清楚。近幾年來，我們科在臨床上用HCQ

2、治療過程中發(fā)現(xiàn)SLE患者外周血中白細(xì)胞，尤其是淋巴細(xì)胞有不同程度的減少。這一現(xiàn)象提示HCQ可能通過對(duì)淋巴細(xì)胞影響達(dá)到緩解病情的目的。通過HCQ對(duì)淋巴細(xì)胞凋亡及Th17細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子IL-17分泌影響的研究，探討Hco治療SLE可能的作用機(jī)制。
　　 目的：
　　 1.觀察HCQ對(duì)SLE患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheralbloodmononuclearcells，PBMC)的影響；
　　 2.研究H

3、CQ對(duì)SLE患者PBMC凋亡的影響；
　　 3.研究Hco對(duì)T淋巴細(xì)胞中Th17細(xì)胞及IL-17因子表達(dá)水平的影響，探討HCQ治療SLE患者可能的作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 1.臨床部分：納入研究的40例初發(fā)穩(wěn)定期SLE患者隨機(jī)分為單用CTX組、HCQ+CTX組，進(jìn)行比較對(duì)淋巴細(xì)胞的影響，觀察指標(biāo)一血常規(guī)中白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血沉、補(bǔ)體C3、SLEDAI;隨訪時(shí)點(diǎn)：0周（基線）、6周、12周;
　　 2

4、.基礎(chǔ)部分：抽取20例初發(fā)活動(dòng)期SLE患者外周血，提取PBMC進(jìn)行培養(yǎng)，用HCQ、NH2不同藥物，不同濃度進(jìn)行干預(yù)，培養(yǎng)24h、48h用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PBMC凋亡及Th17細(xì)胞表達(dá)水平的影響；提取細(xì)胞上清液用ELISA檢測(cè)IL-17細(xì)胞因子的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.臨床指標(biāo)評(píng)估
　　 基線時(shí)，單用CTX組與HCQ+CTX組比較，WBC、LY、ESR、補(bǔ)體C3、SLEDAI等指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.

5、05）;
　　 隨訪6周時(shí)，與基線值相比，兩組SLEDAI評(píng)分均顯著下降（P＜0.05），但其變化程度及兩組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；WBC、LY、ESR、補(bǔ)體C3等療效指標(biāo)及其變化程度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；
　　 隨訪12周時(shí)，與基線值相比，兩組SLEDAI評(píng)分、ESR均顯著下降（P＜0.05），補(bǔ)體C3顯著升高（P＜0.05）；HCQ+CTX組與CTX組比較WBC、LY不同程度下降，但H

6、CQ+CTX組比CTX組更顯著（P＜0.05）；與隨訪6周相比，各療效指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；6周到12周SLEDAI評(píng)分的下降程度HCQ+CTX組較單用CTX組顯著（P＜0.05）；ESR、補(bǔ)體C3的變化程度兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.SLE患者提取PBMC培養(yǎng)加入HCQ、NH2兩種藥物、不同劑量，Hco小劑量組（終濃度為5μg/ml）、HCQ大劑量組（終濃度25μg/ml）、NH2小劑量組(終濃度為0

7、.1μg/ml)、NH2大劑量組（終濃度1μg/ml）。用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示：24hHCQ(10.325±0.713)％和NH2(8.490±1.065)%(P＜0.05);48hHCQ(18.863±4.101)%和NH2(17.654±3.543)%(P＜0.05)兩者比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　 3.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Th17細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，數(shù)據(jù)顯示SLE患者Hco組與NHz組分別為(0.81±0.13)%和(0.7

8、6±0.26)%，兩組比較有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；
　　 4.用ELISA檢測(cè)SLE患者Hco組與NH2組細(xì)胞上清液IL-17分泌水平有差別，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.HCQ可以改善SLE患者病情，但引起白細(xì)胞，尤其是淋巴細(xì)胞不同程度的減少；
　　 2.HCQ治療SLE患者的作用機(jī)制，通過體外實(shí)驗(yàn)證明HCQ有誘導(dǎo)PBMC凋亡的作用，HCQ降低PBMC中Th