外周血單個(gè)核細(xì)胞早期凋亡與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者器官-系統(tǒng)損害的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，SLE)是一種常見典型的自身免疫性疾病，其免疫學(xué)特征為患者體內(nèi)的多克隆自身反應(yīng)性T、B淋巴細(xì)胞激活，產(chǎn)生抗核小體抗體家族(抗核小體抗體、抗組蛋白抗體、抗dsDNA抗體)等大量自身抗體。該病可造成全身多系統(tǒng)、多臟器損害，尤以腎臟損害最嚴(yán)重。SLE病因至今尚未完全明確，可能涉及遺傳背景、環(huán)境暴露、感染、藥物、激素紊亂和免疫異常等因素，其中細(xì)胞凋亡異常已成為SLE

2、免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制研究熱點(diǎn)之一。 動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的缺陷如fas和fasL基因的缺陷，可直接引起鼠狼瘡樣綜合征；人群研究也顯示SLE患者外周血淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞凋亡增加和(或)吞噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的清除功能減弱，造成晚期凋亡細(xì)胞積聚過多，且免疫系統(tǒng)對(duì)其識(shí)別發(fā)生障礙，從而打破自身免疫耐受。而且已有研究表明DNA的免疫原性并不強(qiáng)，不是SLE的主要致病自身抗原。眾多研究提示細(xì)胞凋亡過程中細(xì)胞膜分子的重新分布、修飾以

3、及凋亡小體破裂釋放出的核小體才是SLE真正的“驅(qū)動(dòng)性抗原”，即凋亡釋放出的核小體及胞質(zhì)大分子等作為自身抗原，被樹突狀細(xì)胞識(shí)別、遞呈給細(xì)胞毒性T細(xì)胞及輔助性T細(xì)胞，激活自身反應(yīng)性B細(xì)胞，產(chǎn)生自身抗體，繼而形成循環(huán)免疫復(fù)合物，沉積于全身多個(gè)器官，造成多系統(tǒng)的多臟器損害。 目的:比較系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，SLE)患者和正常對(duì)照兩組間的外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheralbloodmon

4、onuclearcells，PBMCs)的早期凋亡率及其膜上Fas(membrane-boundFas，mFas)／FasL(membrane-boundFasL，mFasL)、血清可溶性Fas(serumsolubleFas，sfas)／FasL(serumsolubleFasL，sFasL)、與血清可溶性核小體(serumsolublenucleosome)及抗核小體抗體家族分子(thelargefamilyofantinucleo

5、someantibodies)(包括抗核小體抗體、抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體)的表達(dá)水平；分析PBMCs早期凋亡率與SLE患者自身抗體和疾病活動(dòng)度的關(guān)系，考察PBMCs早期凋亡率、mFas、mFasL、sfas和sFasL、核小體及抗核小體抗體家族分子與SLE患者器官／系統(tǒng)損害之間的關(guān)系，并探討mFas、mFasL、sfas、sFasL和核小體及抗核小體抗體家族與患者器官／系統(tǒng)損害的關(guān)聯(lián)是否涉及細(xì)胞凋亡。 方法:病例組選自兩

6、所三甲醫(yī)院住院SLE患者，以健康個(gè)體為正常對(duì)照組；參照系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)性指數(shù)(SystemicLupusErythematosusDiseaseActivityIndex，SLEDAI)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡損傷指數(shù)(SystemicLupusIntemationalCollaborativeClinics／AmericanCollegeofRheumatologyDamageIndex，SLICC／ACRDI)量表，設(shè)計(jì)問卷，收集患者

7、的一般情況和器官／系統(tǒng)損害資料。利用流式細(xì)胞儀，采用連接素V(annexinV，AV)和碘化丙啶(propidiumiodide，PI)雙染法檢測(cè)研究對(duì)象的PBMCs早期凋亡率；運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)，檢測(cè)PBMCs膜上mFas和mFasL的表達(dá)；以雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定研究對(duì)象外周血sfas和sFasL、可溶性核小體及抗核小體抗體家族分子的表達(dá)水平。資料分析采用廣義線性模型。 結(jié)論SLE患者的PBMCs早期凋亡率顯著升高，且與患