催產(chǎn)素誘導(dǎo)脂肪來(lái)源細(xì)胞向心肌細(xì)胞方向分化.pdf

1、研究背景：
　　 脂肪組織含有成熟脂肪細(xì)胞及脂肪組織來(lái)源干細(xì)胞(Adiposetissuederivedstemcell，簡(jiǎn)稱ADSC)。成熟脂肪細(xì)胞在天花板培養(yǎng)下，吐脂變成具有干細(xì)胞特性的去分化脂肪細(xì)胞（DedifferentiatedFAT，簡(jiǎn)稱DFAT）。ADSC和DFAT都已被證明具有分化為心肌樣細(xì)胞的能力。催產(chǎn)素（Oxytocin，簡(jiǎn)稱OT）被證明能將胚胎腫瘤干細(xì)胞P19及P19CL6誘導(dǎo)分化成心肌細(xì)胞，但它能否將AD

2、SC及DFAT細(xì)胞誘導(dǎo)成心肌細(xì)胞尚無(wú)報(bào)道。
　　 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br>　　 檢驗(yàn)OT能否將ADSC及DFAT誘導(dǎo)成為心肌樣細(xì)胞。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：
　　 從脂肪中分離得到ADSC及成熟脂肪細(xì)胞。通過(guò)天花板培養(yǎng)是成熟脂肪細(xì)胞去分化為DFAT。按照不同誘導(dǎo)的時(shí)間（1周，2周,3周）及不同濃度(10-8M，10-7M，10-6M)分組對(duì)ADSC和DFAT進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)。通過(guò)RT-PCR，免疫熒光及WesternBlot分

3、別在基因水平和蛋白水平檢測(cè)心肌特異性標(biāo)記的表達(dá)。以人類心肌組織作為陽(yáng)性對(duì)照，未加誘導(dǎo)的ADSC及DFAT細(xì)胞作為陰性對(duì)照。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 高濃度OT(1O-6M)造成實(shí)驗(yàn)細(xì)胞大量死亡，無(wú)法進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。10-8M及10-7M濃度的催產(chǎn)素誘導(dǎo)三周后，ADSC和DFAT在基因及蛋白水平檢測(cè)到心臟特異性標(biāo)記GATA4，NKX2.5，c-TnT的表達(dá)，但是未發(fā)現(xiàn)自主搏動(dòng)現(xiàn)象。相同誘導(dǎo)條件下，兩種細(xì)胞在基因和蛋白水平無(wú)顯