培美曲塞聯(lián)合索拉非尼對肺癌細(xì)胞株的生物學(xué)作用及其機制探討.pdf

1、目的：化療藥物和靶向藥物作用機制不同，聯(lián)合應(yīng)用可能產(chǎn)生增效作用，故聯(lián)合用藥是研究熱點。但目前國內(nèi)、外尚無多靶點酪氨酸激酶（RTK）抑制劑（索拉非尼）和化療藥物（培美曲塞）聯(lián)合用藥療效的研究。因此我們探討索拉非尼和培美曲塞聯(lián)合治療對EGFR-TKIs耐藥的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株的細(xì)胞毒作用、最佳的聯(lián)合用藥方式以及協(xié)同和拮抗作用的機制。
　　方法：在A549（EGFR野生型和KRAS突變）和H1975（EGFR突變和KRAS野生型）EGF

2、R-TKIs耐藥的細(xì)胞株中進(jìn)行研究。觀察培美曲塞和/或索拉非尼聯(lián)合應(yīng)用的IC50值，CI（聯(lián)合指數(shù)）以及對細(xì)胞周期分布、MAPK信號通路的影響。
　　結(jié)果：在A549和H1975兩個EGFR-TKIs耐藥的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中聯(lián)合應(yīng)用索拉非尼和培美曲塞的細(xì)胞毒性作用呈劑量依賴性。培美曲塞序貫索拉非尼可產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，優(yōu)于索拉非尼序貫培美曲塞以及兩藥同時應(yīng)用。索拉非尼和培美曲塞聯(lián)合應(yīng)用的細(xì)胞毒性作用呈程序依賴性。細(xì)胞周期分析顯示索拉非

3、尼阻抑細(xì)胞在G1期，而培美曲塞阻抑細(xì)胞在S期。先用索拉非尼誘導(dǎo)細(xì)胞阻滯在G1期，阻礙了隨后特異性作用于S期的細(xì)胞毒性藥物（培美曲塞），從而產(chǎn)生拮抗作用。細(xì)胞信號通路分析顯示培美曲塞導(dǎo)致p44/42MAPK水平的增加可被繼之應(yīng)用的索拉非尼所抑制。MAPK激酶抑制劑U0126同樣呈程序依賴性地增強培美曲塞的細(xì)胞毒作用。序貫應(yīng)用U0126同樣可抑制培美曲塞激活MAPK信號通路。
　　結(jié)論：在EGFR-TKIs耐藥的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中，