索拉非尼聯(lián)合柔紅霉素對(duì)K562細(xì)胞株作用的研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文索拉非尼聯(lián)合柔紅霉素對(duì)K562細(xì)胞株作用的研究姓名：王立琳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：血液病學(xué)指導(dǎo)教師：肖若芝20090530中山大學(xué)碩士學(xué)位論文索拉非尼聯(lián)合柔紅霉素對(duì)K562細(xì)胞株增殖、凋亡作用的研究研究目的研究不同濃度索拉非尼(sorafenib)單藥和聯(lián)合柔紅霉素(DNR)對(duì)k562細(xì)胞株增殖、凋亡的影響，為白血病臨床治療探索療效可靠而毒副作用較小的新方法。方法1、細(xì)胞株按照細(xì)胞密度105／m1106／ml接種于培

2、養(yǎng)瓶中，按細(xì)胞密度為105／ml一106／ml接種于培養(yǎng)瓶中，使用RPMll640培養(yǎng)液(10％的小牛血清)，37“C，5％C02培養(yǎng)箱內(nèi)常規(guī)培養(yǎng)。2、MTT法檢測(cè)索拉非尼聯(lián)合柔紅霉素對(duì)K562的增殖抑制作用，確定藥物IC50及最佳作用濃度及時(shí)間。統(tǒng)計(jì)分析各組增殖差異。3、采用兩藥相互作用指數(shù)(coefficientofdruginteraction，CDI)評(píng)價(jià)兩藥相互作用性質(zhì)，CDI按下列公式計(jì)算：CDI=AB／(AB)。根據(jù)活細(xì)胞

3、數(shù)(吸光值)進(jìn)行計(jì)算，AB為兩藥聯(lián)合組與對(duì)照組吸光值的比值；A或B是各藥物單獨(dú)使用組與對(duì)照組吸光值的比值。當(dāng)CDII，則兩藥作用性質(zhì)為拮抗。4、Hoechst33258熒光染色對(duì)不同處理組細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察。5、流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定不同處理組K562細(xì)胞凋亡率，對(duì)比凋亡情況。6、運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCRi貝IJ定不同處理組CAVl、CCNDl、NQQl等基因的表達(dá)量。復(fù)士國(guó)拿日術(shù)1、柔紅霉素06ltg／ml，1O刪，2O刪和索拉非尼4pg／ml

4、，8lrdml，12Itg／m1分別單用和聯(lián)合作用于K562細(xì)胞24h。柔紅霉素組、索拉非尼組以及柔紅霉素索拉非尼組中K562細(xì)胞的生長(zhǎng)均被抑制，聯(lián)合用藥組對(duì)細(xì)胞的抑制率明顯高于單獨(dú)用藥組。藥物劑量與抑制率之間呈現(xiàn)明顯的劑量效應(yīng)依賴關(guān)系。柔紅霉素與索拉非尼半數(shù)抑制率0c50)分別為252I_tg／ml，8911Lg／ml。兩藥聯(lián)合作用時(shí)的相互作用系數(shù)1，表明兩者聯(lián)合具有協(xié)同作用。2、陰性對(duì)照組細(xì)胞經(jīng)Hoechst33258染色后細(xì)胞核呈