紅細(xì)胞膜收縮蛋白作為正己烷周圍神經(jīng)毒效應(yīng)替代標(biāo)志物的研究.pdf

1、目的 研究正己烷周圍神經(jīng)毒效應(yīng)與紅細(xì)胞膜收縮蛋白(又叫血影蛋白,spectrin,Sp)共價交聯(lián)的關(guān)系.方法 SD大鼠正己烷灌胃,分0、168、675、2700 mg/kg四組,5d/周、連續(xù)8周,觀察動物體重、臟器指數(shù)(心、肝、脾、肺、腎、腦和睪丸)、生化指標(biāo)(谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、球蛋白、總膽紅素、直接膽紅素、堿性磷酸酶、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、尿素氮、肌酐、尿酸、葡萄糖、乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、磷酸肌酸激酶同工酶、羥丁酸

2、脫氫酶、總膽汁酸、膽堿酯酶)、混合神經(jīng)傳導(dǎo)速度(mixed nerves conduction velocity,MNCV)和斜板法測肌力功能,光、電鏡觀察脛神經(jīng).雙縮脲法測抽提的紅細(xì)胞膜蛋白濃度,聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后銀染,光密度掃描計算蛋白含量,用Western blot鑒定Sp.結(jié)果 染毒8周后,27

3、00mg/kg組動物后肢癱瘓、癱瘓率為80％,體重減輕、MNCV減慢、肌力下降(P<0.05),主要生化指標(biāo)未見明顯變化,腎、心、肝、肺、腦指數(shù)明顯上升(P<0.05),脛神經(jīng)光鏡下表現(xiàn)為軸索數(shù)目稀疏、髓鞘變薄,電鏡下軸索大小不一、部分腫脹、神經(jīng)絲密度增加、部分髓鞘回縮.紅細(xì)胞膜蛋白濃度為:5.88±0.89g/L,電泳后銀染見240kD條帶之上有異常條帶,經(jīng)Western blot證實為Sp共價交聯(lián)產(chǎn)物,帶形為連續(xù)"拖尾"狀.共價交聯(lián)