硼酸消毒液促進(jìn)糖尿病難愈性創(chuàng)面愈合的護(hù)理效用及相關(guān)機(jī)制初探.pdf

1、背景和目的:
　　糖尿病難愈性創(chuàng)面是包括糖尿病足和其他糖尿病創(chuàng)面在內(nèi)的,由多種原因引起的經(jīng)久不愈的創(chuàng)面,是最嚴(yán)重、花費(fèi)最高的糖尿病慢性并發(fā)癥之一,嚴(yán)重的糖尿病足可導(dǎo)致截肢、甚至死亡。調(diào)查顯示,我國約有30％的非創(chuàng)傷性截肢是由于糖尿病足引發(fā)。糖尿病難愈性創(chuàng)面發(fā)生發(fā)展機(jī)制及護(hù)理是臨床研究的難點(diǎn)和熱點(diǎn)。
　　TGF-β1/Smads信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是糖尿病難愈性創(chuàng)面修復(fù)中重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之一。TGF-β1是介導(dǎo)組織硬化和間質(zhì)纖維化的

2、關(guān)鍵細(xì)胞因子,參與了細(xì)胞分化、增殖、粘附、血管生成、炎癥反應(yīng)和創(chuàng)面愈合等過程,還能促成成纖維細(xì)胞的遷移和增殖,趨化、刺激成纖維細(xì)胞生成細(xì)胞外基質(zhì)。研究顯示,糖尿病難愈性創(chuàng)面的形成與創(chuàng)面TGF-β1表達(dá)的絕對或相對不足有關(guān)。近年,弱酸環(huán)境對難愈性創(chuàng)面的愈合有促進(jìn)作用的臨床個(gè)案已有少量報(bào)道。我們認(rèn)為其機(jī)制除了弱酸環(huán)境對創(chuàng)面微生物有一定的抑制作用外,還可能與其能刺激創(chuàng)面Tgf-β1 mRNA的表達(dá)有關(guān),這可能是其促進(jìn)創(chuàng)面愈合的重要機(jī)制之一,值

3、得深入研究。
　　4%硼酸溶液作為臨床常見的消毒劑,具有弱酸性和較低的細(xì)胞毒性,多用于皮膚、粘膜及傷口的消毒處置,有部分臨床研究也曾運(yùn)用硼酸對下肢淺表潰瘍、褥瘡等創(chuàng)面進(jìn)行處理并取得了較好效果。本研究因此進(jìn)行了硼酸消毒液促進(jìn)糖尿病難愈性創(chuàng)面愈合的護(hù)理效用及其相關(guān)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究,以期為臨床糖尿病難愈性創(chuàng)面護(hù)理措施的細(xì)化和修訂提供更科學(xué)的參考依據(jù)。
　　材料與方法:
　　1.動(dòng)物分組與模型建立:8周齡雄性C57BL/6小鼠3

4、0只,購買并飼養(yǎng)于第三軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心SPF級動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室,隨機(jī)分為糖尿病組與正常對照組,各15只。每組中又分為3天、7天、14天三個(gè)時(shí)相點(diǎn)(每個(gè)時(shí)相點(diǎn)5只)。糖尿病組小鼠以鏈脲佐菌素誘導(dǎo)建模,角膜環(huán)鉆制作小鼠背部創(chuàng)面。
　　2.每日1次,在同一時(shí)段分別以0.9%生理鹽水(A處理)、4%硼酸溶液(B處理)、0.5%碘伏+3%過氧化氫溶液(C處理)對不同組別小鼠創(chuàng)面進(jìn)行清洗換藥,觀察記錄創(chuàng)面結(jié)痂情況、愈合情況及創(chuàng)面大小,并拍照。<

5、br>　　3.在不同時(shí)相點(diǎn)用 Trizol提取小鼠創(chuàng)面組織的總 RNA,在檢測 RNA濃度、RT-PCR反應(yīng)后,獲得cDNA。
　　4.采用SYBR Green Q-PCR法對上述創(chuàng)面組織的cDNA進(jìn)行Tgf-β1、Smad4、Collagen I的mRNA相對表達(dá)量檢測。
　　結(jié)果:
　　1.硼酸對創(chuàng)面愈合率的影響
　　糖尿病硼酸處理組各時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面愈合率較其余處理組的創(chuàng)面愈合率提高明顯(P<0.05)。

6、　　2.硼酸對創(chuàng)面Tgf-β1 mRNA表達(dá)的影響
　　正常小鼠硼酸處理組3天時(shí)Tgf-β1 mRNA的表達(dá)均較其余處理組明顯增高(P<0.05);糖尿病小鼠硼酸處理組在傷后3天、14天時(shí)其Tgf-β1 mRNA的表達(dá)較其余處理組有顯著升高(P<0.01)。
　　3.硼酸對創(chuàng)面Smad4 mRNA表達(dá)的影響
　　正常小鼠硼酸處理組傷后14天時(shí)其 Smad4 mRNA表達(dá)低于其余處理組(P<0.05);糖尿病小鼠傷后14

7、天生理鹽水組Smad4 mRNA的表達(dá)明顯低于碘伏+雙氧水處理組(P<0.05)。
　　4.硼酸對創(chuàng)面Collagen I mRNA表達(dá)的影響
　　糖尿病小鼠和正常小鼠在傷后3天時(shí)均表現(xiàn)為硼酸處理組和碘伏+雙氧水處理組的Collagen I mRNA的表達(dá)高于生理鹽水組(P<0.05);14天時(shí),糖尿病小鼠硼酸組和生理鹽水組Collagen I mRNA的表達(dá)高于碘伏+雙氧水處理組(P<0.05),正常小鼠則是碘伏+雙氧水組

8、Collagen I mRNA表達(dá)高于生理鹽水和硼酸組。
　　結(jié)論:
　　1.不管在早期還是中晚期,硼酸處理對提高糖尿病小鼠傷口愈合率,促進(jìn)創(chuàng)面愈合均達(dá)到了很好的效果;
　　2.硼酸促進(jìn)糖尿病小鼠創(chuàng)面愈合的作用機(jī)制可能與其特殊的酸性條件能更好地刺激創(chuàng)面Tgf-β1、Collagen I mRNAs的表達(dá)有關(guān);
　　3.正常小鼠早期使用硼酸和生理鹽水都能較好地促進(jìn)創(chuàng)面愈合,晚期使用碘伏+雙氧水對促進(jìn)創(chuàng)面愈合效果更好