骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞促進糖尿病大鼠創(chuàng)面愈合的實驗研究.pdf

1、目的：實驗通過對大鼠糖尿病創(chuàng)面模型的建立，將經(jīng)過BrdU標(biāo)記的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞局部注射到創(chuàng)面組織周圍，并設(shè)計對照組，對兩組創(chuàng)面愈合率的差異進行統(tǒng)計學(xué)分析；同時觀察標(biāo)記的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在創(chuàng)面組織中的去向與分化，從而評價骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對糖尿病創(chuàng)面愈合的影響。
　　 方法：(1)糖尿病大鼠模型的建立：采用一次性腹腔內(nèi)注射鏈脲佐菌素；(2)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和純化擴增：采用全骨髓培養(yǎng)法；(3)創(chuàng)面愈合率的計算：應(yīng)用透明膜法，

2、并對其差異進行統(tǒng)計學(xué)分析；(4)組織病理學(xué)觀察：對創(chuàng)面組織進行蘇木精-伊紅染色；(5)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分布與去向：對創(chuàng)面周圍組織進行免疫組織化學(xué)染色，連續(xù)切片觀察該細(xì)胞向皮膚組織細(xì)胞分化。
　　 結(jié)果：(1)成功構(gòu)建了糖尿病大鼠創(chuàng)面的模型；(2)成功分離培養(yǎng)了大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞且純化擴增；(3)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞明顯提高了糖尿病大鼠創(chuàng)面愈合率，并具有統(tǒng)計學(xué)意義；(4)蘇木精-伊紅染色結(jié)果顯示：實驗組新生表皮較對照組厚，細(xì)胞層數(shù)

3、較多且分層明顯，基底細(xì)胞呈單層柱狀排列，結(jié)合緊密，組織結(jié)構(gòu)完整，較多的皮膚附屬器分布于真皮層中；(5)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：表皮、真皮及皮下組織中均可見到BrdU陽性細(xì)胞，細(xì)胞核呈深棕色，尤以真皮層血管周圍多見，部分細(xì)胞位于表皮層、皮脂腺及腺導(dǎo)管上皮中；連續(xù)切片中BrdU陽性細(xì)胞同時也表達(dá)角蛋白，細(xì)胞胞漿呈棕黃色，以腺導(dǎo)管上皮中多見。
　　 結(jié)論：將標(biāo)記的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植到糖尿病大鼠創(chuàng)面組織中，該細(xì)胞在糖尿病創(chuàng)面微環(huán)境下