AcSDKP及GABAB受體調(diào)控腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的信號(hào)機(jī)制研究.pdf

1、Acetyl-N-Ser-Asp-Lys-Pro(AcSDKP)是由脯氨酰寡肽酶(POP)特異性地水解人體胸腺素β4氨基端而產(chǎn)生的天然產(chǎn)物。AcSDKP不僅可以抑制造血干細(xì)胞的增殖，并且可以促進(jìn)新血管的生成。前期研究發(fā)現(xiàn)在白血病及實(shí)體瘤等患者體內(nèi)內(nèi)源性的AcSDKP均高度表達(dá)。相比于正常的小鼠，AcSDKP在患急性髓細(xì)胞樣白血病小鼠的血漿和骨髓干細(xì)胞中的濃度高出5到10倍。同樣，各種實(shí)體瘤（甲狀腺、乳腺、結(jié)腸、腦部和頸椎、腎臟、肺部、皮

2、膚、卵巢以及前列腺癌等）患者血液中AcSDKP的濃度顯著高于健康個(gè)體。此外，也有一部分研究表明AcSDKP對(duì)癌癥的發(fā)病機(jī)理沒(méi)有幫助。到目前為止，AcSDKP在腫瘤發(fā)生中的作用機(jī)制并不清晰，其誘導(dǎo)的下游信號(hào)通路也研究甚少。研究結(jié)果顯示，外源AcSDKP對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞增殖的影響并不明顯。在AcSDKP含量比較高的惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87-MG中，用來(lái)抑制細(xì)胞中內(nèi)源AcSDKP的生成的POPi（POP的特異性抑制劑，S17092）的濃度和抑制細(xì)胞

3、增殖的POPi濃度并不是呈相關(guān)的。更有趣的是，高濃度POPi引起的U87-MG增殖水平的降低可以被外源加入的AcSKDP所恢復(fù)，而這種效應(yīng)與PI3K/Akt通路的激活相關(guān)。但是POPi和AcSDKP的共處理并不能改變ERK的磷酸化水平。AcSDKP誘導(dǎo)的PI3K的兩個(gè)催化亞基p110α和p110β對(duì)U87-MG細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)的作用是不同的：用siRNA片段干擾掉p110α的表達(dá)可以阻止Akt磷酸化水平的恢復(fù)，而p110β RNA水平表達(dá)的

4、下調(diào)沒(méi)有該效應(yīng)。發(fā)現(xiàn)首次證明了AcSDKP在PI3K/Akt這條信號(hào)通路上對(duì)細(xì)胞增殖的調(diào)節(jié)具有很重要的作用。
　　GABAB受體作為G蛋白偶聯(lián)受體C家族成員之一，已有報(bào)道暗示它在腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲中發(fā)揮著一定的功能，但其分子機(jī)制目前尚不明確。前期研究結(jié)果顯示GABAB受體被激活后能通過(guò)轉(zhuǎn)激活I(lǐng)GF-1R保護(hù)細(xì)胞免受凋亡。除此之外，還發(fā)現(xiàn)單獨(dú)的GB1asa能通過(guò)轉(zhuǎn)激活I(lǐng)GFR誘導(dǎo)ERK的磷酸化，這也是首次發(fā)現(xiàn)單獨(dú)的GB1能上膜行使獨(dú)立

5、的功能，暗示著GB1亞基在GABAB受體功能發(fā)揮中扮演著重要的角色。在本課題中首先利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了GABAB受體在不同細(xì)胞系中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)它在腫瘤細(xì)胞中的分布是多樣化的，而且GB1的mRNA表達(dá)水平遠(yuǎn)高于GB2。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)GABAB受體特異性的激動(dòng)劑Baclofen和陽(yáng)性變構(gòu)劑CGP7930能夠明顯地抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87-MG的增殖。GABAB受體被激活后還能影響AKT、ERK、FAK和PKD等蛋白的磷酸化。除此之