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文檔簡介
1、目的:
鋁(Al)是一種低毒元素,但在體內(nèi)大量蓄積時也可產(chǎn)生多種毒作用,神經(jīng)組織對鋁尤為敏感,易導致神經(jīng)元損傷而造成學習和記憶方面的缺陷,氧化應激是公認的一種中毒機制,鋁對神經(jīng)系統(tǒng)的毒作用與脂質(zhì)過氧化密切相關。有研究認為,鋁可促進腦組織的脂質(zhì)過氧化反應,這是其發(fā)揮神經(jīng)毒作用的重要機制之一。雖然鋁本身不具有氧化性,但它可增強過渡態(tài)金屬對機體的氧化損傷,特別是增強鐵催化的活性氧(ROS)的生成,影響Nrf2/ARE通路,進而導
2、致氧化應激,對細胞產(chǎn)生毒害作用。
本研究將在現(xiàn)有工作基礎上,建立大鼠鋁暴露模型,通過觀察動物學習記憶能力改變,腦組織細胞內(nèi)GSH含量和活性氧生成水平,Nrf2/ARE通路與GCS的基因和蛋白表達水平,結(jié)合神經(jīng)細胞超微結(jié)構的異常變化,運用神經(jīng)行為學、組織化學、分子生物學和組織形態(tài)學等多種技術手段,從脂質(zhì)過氧化角度來闡明Nrf2/ARE通路在鋁所致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷中的作用。
方法:
本研究通過飲水染
3、毒90天建立鋁暴露大鼠模型,觀察染鋁動物學習記憶能力改變,海馬組織MDA、GSH含量,GSH-Px、GR和γ-GCS酶活性及Nrf2、γ-GCS的基因和蛋白表達水平。穿梭箱及Morris水迷宮實驗檢測大鼠學習記憶能力。采用透射電鏡技術觀察大鼠海馬組織神經(jīng)元和神經(jīng)突觸超微結(jié)構;脂質(zhì)過氧化試劑盒法檢測MDA、GSH含量及GSH-Px、GR和γ-GCS的酶活性;Real-time PCR法檢測Nrf2及γ-GCS mRNA水平;Western
4、 blot法檢測Nrf2及γ-GCS蛋白表達。
結(jié)果:
隨著染鋁劑量的增加,大鼠血鋁水平逐漸升高;Morris水迷宮定位航行實驗中,染鋁大鼠尋找平臺的潛伏期延長,游泳距離延長而運行軌跡更趨復雜,Morris水迷宮空間探索實驗中,染鋁大鼠尋找原隱蔽平臺的趨向性及策略性降低,進入目標象限的次數(shù)和在目標象限的停留時間減少;隨著染鋁劑量的增加,染鋁組動物穿梭箱實驗電擊次數(shù)增多,電擊時間延長,而主動逃避時間和主動逃避潛
5、伏時間均延長;隨著染鋁劑量的增加,大鼠海馬組織MDA含量逐漸升高而GSH水平逐漸下降,均有一定的劑量-效應關系(P<0.05),而GSH-Px及GR酶活性下降,γ-GCS酶活性升高。海馬Nrf2、γ-GCS mRNA及蛋白表達水平隨著染鋁劑量的增加而增加。隨著染鋁劑量的增加,大鼠海馬神經(jīng)元和神經(jīng)突觸的超微結(jié)構損害程度增加。
結(jié)論:
1.鋁暴露引起大鼠血鋁含量增加,海馬系數(shù)下降;
2.鋁暴露可以造
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