神經(jīng)調(diào)節(jié)素-1β對(duì)腦出血氧化應(yīng)激損傷及Nrf2-ARE通路的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　本研究通過建立大鼠腦出血模型，探討神經(jīng)調(diào)節(jié)素-1β（neuregulin-1β，NRG-1β)對(duì)大鼠腦出血神經(jīng)功能障礙與腦水腫的療效，并通過檢測(cè)內(nèi)源性抗氧化通路 Nrf2(核因子相關(guān)因子2)/ARE（抗氧化反應(yīng)元件）及下游關(guān)鍵分子的表達(dá)，探索NRG-1β在腦出血中的抗氧化作用機(jī)制。
　　方法：
　　成年健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、治療組，每組按造模后1d、3d、5d再分為3個(gè)亞組。采用立體定

2、位尾狀核注射Ⅳ型膠原酶（0.5U/只）建立大鼠腦出血模型，模型組及治療組注入Ⅳ型膠原酶，假手術(shù)組注入等量的滅菌生理鹽水。于術(shù)后2小時(shí)治療組大鼠經(jīng)尾靜脈注射重組人NRG-1β（2μg/kg）干預(yù)治療，模型組及假手術(shù)組給予等體積的0.1mol/L PBS溶液。分別于各觀察時(shí)間點(diǎn)對(duì)各組大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分、干濕重法檢測(cè)腦含水量，采用免疫組化法、蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測(cè)血腫周圍組織Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)變化。

3、>　　結(jié)果：
　　1、神經(jīng)功能缺損評(píng)分：模型組第1天即出現(xiàn)明顯的神經(jīng)功能缺損，第3天達(dá)高峰，神經(jīng)功能缺損最重，第5天仍有明顯的神經(jīng)功能缺損，但較高峰時(shí)減輕，模型組與假手術(shù)組比較，各時(shí)間點(diǎn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；治療組運(yùn)動(dòng)、感覺、平衡、反射缺損程度減輕，治療組與模型組比較，在各觀察時(shí)間點(diǎn)評(píng)分均低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；
　　2、腦含水量：模型組大鼠腦含水量呈先升高后下降趨勢(shì)，在造模第1天即出現(xiàn)腦水

4、腫，在第3天達(dá)到高峰，后開始下降，但仍高于假手術(shù)組。假手術(shù)組和模型組比較，各時(shí)間點(diǎn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；在治療組中，各時(shí)間點(diǎn)腦水腫程度都有所減輕，治療組與模型組比較，各觀察時(shí)間點(diǎn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3、免疫組化檢測(cè)結(jié)果：模型組Nrf2、HO-1于造模后第1天開始升高，在第3天達(dá)高峰，而后下降，但表達(dá)仍高于假手術(shù)組。模型組與假手術(shù)組比較，各時(shí)間點(diǎn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療組各時(shí)間點(diǎn)蛋白

5、表達(dá)較模型組升高，治療組與模型組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。
　　4、Western Blot檢測(cè)結(jié)果：模型組在第1天即檢測(cè)出Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)升高，第3天達(dá)高峰，第5天較峰值有所回落，模型組與假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療組各時(shí)間點(diǎn)Nrf2、HO-1蛋白的表達(dá)較模型組均有明顯的升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　在大鼠腦出血模型中，Nrf2-ARE通路