宮內(nèi)感染致腦損傷新生鼠MBP、S-100水平及神經(jīng)行為學(xué)研究.pdf

1、目的：研究宮內(nèi)感染致新生大鼠腦損傷的病理及生化改變，并對腦損傷大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)檢測以鑒定腦性癱瘓。 方法：1.動物模型制備：給予37只孕第18、19天的脂多糖(LPS)組大鼠LPS500μg/kg·d，連續(xù)兩天腹腔注射，10只生理鹽水組孕鼠腹腔注射同劑量的生理鹽水。孕22天前分娩的仔鼠為早產(chǎn)仔鼠。觀察兩組孕鼠的分娩時間及新生仔鼠的出生體重。兩組均去除早產(chǎn)仔鼠。仔鼠出生后，將LPS組和生理鹽水組母鼠處死，取子宮和胎盤做HE染色觀

2、察宮內(nèi)感染情況，判斷標(biāo)準(zhǔn)為大量中性粒細(xì)胞浸潤。隨機(jī)選取生理鹽水組和LPS組仔鼠各80只，分為7日齡生理鹽水仔鼠組A1(n=20)，7日齡LPS仔鼠組B1(n=20)，25日齡生理鹽水仔鼠組A2(n=60)，25日齡LPS仔鼠組B2(n=60)。2.病理及生化檢測：將A1和B1組仔鼠斷頭取腦，應(yīng)用免疫組化方法進(jìn)行腦組織髓鞘堿性蛋白(MBP)、S-100蛋白陽性細(xì)胞檢測；取腦組織皮質(zhì)、海馬、內(nèi)囊、胼胝體進(jìn)行電鏡觀察；用酶聯(lián)免疫法測定血液和腦

3、組織中MBP、S-100蛋白含量。3.行為學(xué)檢測及腦性癱瘓鼠鑒定：對A2和B2組仔鼠進(jìn)行隨意運(yùn)動、姿勢、肌張力、不自主運(yùn)動、情感行為能力、傾斜板試驗(yàn)等檢測，記錄各項(xiàng)評分并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。鑒定為腦性癱瘓的大鼠，必須同時具備神經(jīng)行為學(xué)檢查中隨意運(yùn)動障礙、姿勢異常、肌張力異常；伴有或不伴有不自主運(yùn)動、情感行為能力異常；傾斜板試驗(yàn)必須有一項(xiàng)陽性。 結(jié)果：1.LPS組中有10只孕鼠分娩前死亡，9只孕鼠提前分娩，其余18只孕鼠共娩出活產(chǎn)足月

4、仔鼠107只，死產(chǎn)足月仔鼠66只；生理鹽水組孕鼠均順利生產(chǎn)，孕鼠無死亡及提前分娩，共娩出活產(chǎn)足月仔鼠96只；與生理鹽水組仔鼠相比LPS組仔鼠出生時皮膚顏色青紫、活動少、體重低；LPS組子宮及胎盤病理檢測見子宮壁及胎盤內(nèi)血管充血、水腫，并見大量中性粒細(xì)胞浸潤。2.腦組織免疫組化顯示：與A1組相比，B1組腦組織各部位(內(nèi)囊、海馬、皮質(zhì)、胼胝體)MBP陽性染色均減少和減弱(P＜0.01)；B1組腦組織各部位(內(nèi)囊、海馬、皮質(zhì)、胼胝體)S-10

5、0蛋白陽性染色較A1組均增多和增強(qiáng)(P＜0.01)；3.腦組織電鏡顯示：B1組腦組織表現(xiàn)出神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量的脂褐素顆粒，尼氏體減少，神經(jīng)纖維纏繞，突觸膜融合，突觸小泡消失，軸突溶解，線粒體空泡變性，髓鞘板層結(jié)構(gòu)松散、崩解，髓鞘數(shù)量減少，膠質(zhì)細(xì)胞增多等表現(xiàn)。4.血液、腦組織中MBP、S-100蛋白含量：B1組血液中MBP、S-100蛋白含量均高于A1組(P＜0.01)；B1組腦組織中MBP含量低于A1組(P＜0.01)，S-100蛋白