煤工塵肺患者肺巨噬細胞自噬活動研究.pdf

1、目的：研究接塵觀察對象、壹期、貳期、叁期煤工塵肺患者肺巨噬細胞中自噬活動的變化情況，探討自噬活動與煤礦粉塵所致肺部纖維化病變之間關系，并闡述其可能的調(diào)節(jié)機制。
　　方法：選取在中國煤礦工人北戴河療養(yǎng)院進行大容量全肺灌洗，經(jīng)塵肺診斷專家組確診患有煤工塵肺的患者116例，并排除患有肺部相關的疾?。ㄈ绶窝祝伟?，活動性肺結(jié)核等），塵肺伴發(fā)肺部并發(fā)癥及患有嚴重心肺疾病及傳染病的煤工塵肺患者為研究對象。收集其肺灌洗液，經(jīng)純化后得到肺巨噬細胞

2、，用透射電子顯微鏡觀察其自噬相關結(jié)構(gòu)的形態(tài)，包括自噬前體、自噬體、溶酶體和自噬溶酶體。采用蛋白免疫印跡方法檢測自噬標志性蛋白 LC3及自噬調(diào)控蛋白 beclin1、mTOR和p-mTOR的表達量，分析接塵觀察對象、壹期、貳期、叁期煤工塵肺患者肺巨噬細胞自噬活動的強弱變化。根據(jù)研究對象接塵量的不同分組，分析接塵量對肺巨噬細胞自噬活動的影響。根據(jù)研究對象是否脫塵，將研究對象分為間斷接塵組和持續(xù)接塵組，分析脫離粉塵作業(yè)對肺巨噬細胞自噬活動的影

3、響。根據(jù)脫塵年限的不同分組，分析脫塵時間長短對肺巨噬細胞自噬活動的影響。
　　結(jié)果：本研究中，接塵觀察對象、壹期、貳期、叁期的煤工塵肺患者均為男性、漢族。研究對象的平均年齡為（47.50±6.53）歲（27~64歲）。工種包括采煤工、開拓工、掘進工、運輸工、維修工等。叁期煤工塵肺患者的平均接塵年限比接塵觀察對象和壹期煤工塵肺患者長。各期煤工塵肺患者的年齡、吸煙率、脫塵率及脫塵年限比較差別無統(tǒng)計學意義。電鏡觀察發(fā)現(xiàn)不同期別煤工塵肺患

4、者肺巨噬細胞中自噬活動不同，貳期煤工塵肺患者肺巨噬細胞中自噬體較壹期增多，但叁期煤工塵肺患者中的自噬體較貳期減少。貳期煤工塵肺患者肺巨噬細胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表達量高于壹期，叁期煤工塵肺患者肺巨噬細胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表達量低于貳期，并且叁期煤工塵肺患者肺巨噬細胞 LC3Ⅱ/Ⅰ表達量高于壹期，貳期煤工塵肺患者肺巨噬細胞 Beclin1表達量高于接塵觀察對象。貳期煤工塵肺患者肺巨噬細胞mTOR和p-mTOR表達量低于接

5、塵觀察對象和壹期，叁期煤工塵肺患者肺巨噬細胞 mTOR和p-mTOR表達量高于貳期。接塵31~40年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細胞中 LC3Ⅱ/Ⅰ的表達量低于接塵21~30年的煤工塵肺患者，接塵31~40年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細胞中 Beclin1的表達量低于接塵0~10年的煤工塵肺患者，接塵31~40年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細胞中 mTOR和p-mTOR的表達量高于接塵21~30年的煤工塵肺患者。比較間斷接塵與持續(xù)接塵組自噬相關蛋白的表

6、達量，結(jié)果顯示間斷接塵組 LC3Ⅱ/Ⅰ表達量較持續(xù)接塵組高，間斷接塵組 mTOR和p-mTOR的表達量較持續(xù)接塵組低。脫塵1~10年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細胞中LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1的表達量低于脫塵11~20年的煤工塵肺患者。脫塵1~10年的煤工塵肺患者肺泡巨噬細胞中 mTOR和p-mTOR的表達量高于脫塵11~20年的煤工塵肺患者。
　　結(jié)論：自噬活動減弱可能是影響塵肺肺纖維化進展的原因之一。接塵時間過長會導致肺巨噬細胞自