缺血再灌注損傷上調(diào)心肌組織Pim-3基因的表達(dá).pdf

1、目的：觀察缺血再灌注損傷對(duì)大鼠心肌組織Pim-3基因表達(dá)的影響,并探討可能的分子機(jī)制。
　　 方法：1）提取SD大鼠組織，采用RT-PCR，Weston blot技術(shù)檢測(cè)Pim-3基因的組織表達(dá)分布，免疫組化技術(shù)檢測(cè)Pim-3基因在心肌組織的表達(dá)。2）取SD雄性成年大鼠30只，隨機(jī)分為5組，假手術(shù)組，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支15min,30min，結(jié)扎30min再灌注30min，結(jié)扎30min再灌注120min，留取左心室組織，采用

2、RT-PCR法及免疫組化法檢測(cè)Pim-3基因的表達(dá)變化。3）培養(yǎng)原代乳鼠心肌細(xì)胞，并用不同濃度的H2O2（0umol/ml、5umol/ml、10umol/ml、20umol/ml）、腫瘤壞死因子-α(0ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml)處理,應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)各組心肌細(xì)胞Pim-3基因mRNA和蛋白的表達(dá)變化。4）轉(zhuǎn)染Pim-3siRNA 干擾片段到乳鼠心肌細(xì)胞，并用H2O2誘導(dǎo)凋亡，檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡變化。<