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文檔簡介
1、目的建立腎缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury,IRI)缺血后處理(ischemic postconditioning,IPO)大鼠模型,研究IPO對缺血再灌住損傷腎基因表達(dá)譜的影響,探討其保護(hù)機(jī)制。
方法選用8~12周成年健康SD雄性大鼠60只,隨機(jī)分為6組:對照組(S組)、缺血再灌注組IR缺血后處理A、B、C、D組,通過測定血尿素氮(BUN)和肌酐(SCr),腎組織結(jié)構(gòu)損傷程度評分,篩選出
2、成功的IPO模型。然后選取成年健康SD雄性大鼠6只分為2組:缺血再灌注組和IPO組。缺血再灌注組:結(jié)扎右側(cè)腎蒂,夾閉左側(cè)腎蒂60 min后恢復(fù)灌注。IPO組:在腎臟缺血60 min后進(jìn)行6次開放10s+阻斷10s的循環(huán)然后充分開放灌注。飼養(yǎng)24 h后迅速切取左腎,分別將左腎組織放入液氮低溫保存。進(jìn)行RNA抽提、探針制備和芯片雜交,雜交后立即進(jìn)行掃描檢測信號(hào)收集圖像。應(yīng)用Softfire Decisionsite8.0軟件分析某基因是否有
3、表達(dá),以及兩組表達(dá)程度是否有差異。根據(jù)基因編碼蛋白的功能對差異表達(dá)超過兩倍的基因進(jìn)行初步分析。
結(jié)果缺血后處理組與缺血再灌注組腎臟組織比較共有70條基因表達(dá)有差異,基因表達(dá)上調(diào)的有48條,基因表達(dá)下調(diào)的基因有22條。這些基因主要涉及細(xì)胞代謝與損傷、凋亡調(diào)控相關(guān)蛋白、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄、炎癥相關(guān)因子、氧化應(yīng)激相關(guān)因子等。
結(jié)論成功建立了腎缺血再灌注損傷IPO大鼠模型,IPO可能作用于多個(gè)基因靶點(diǎn),減輕腎臟缺血再再灌注損傷。
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