E64D對缺氧缺血性腦損傷后海馬中凋亡、自噬、壞死三種蛋白分子表達(dá)的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過凋亡-自噬-壞死途徑探討缺氧缺血對新生大鼠海馬神經(jīng)元的損傷,以及外源性E64D對腦損傷可能的保護(hù)作用。
   方法:7日齡新生大鼠分三組:假手術(shù)組(A組):僅分離出左側(cè)頸總動脈,不予結(jié)扎,不予低氧處理,與C組同時腹腔注射同等體積的1%DMSO溶液。HIBD模型組(B組):予以結(jié)扎左側(cè)頸總動脈和低氧處理,與C組同時腹腔注射同等體積的l%DMSO。E64D治療組(C組):HIBD建模后1小時每只SD大鼠給予腹腔注射E64D

2、,劑量lOug/0.1ml。
   1.應(yīng)用免疫印跡法(WesternBlot,WB)檢測新生大鼠海馬中Activedcaspase-3、Beclin-1、SpectrinαⅡ(C-3)降解產(chǎn)物三種蛋白分子在0h、2h、6h、12h、24h、48h的表達(dá)變化。2.在48h取大腦組織,利用干濕比重法檢測大腦的含水量。3.光鏡下觀察各組大鼠左側(cè)腦組織HE染色的病理變化。
   結(jié)果:1.HIBD模型組中Activedcasp

3、ase-3蛋白在建模后12h開始明顯表達(dá),至24h達(dá)到高峰,隨后逐漸降低。12h、24h、48h蛋白水平較假手術(shù)組表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。E64D治療組中蛋白水平下降僅在24h的時候與模型組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。2.HIBD模型組中Beclin-1蛋白在建模后6h開始明顯表達(dá),至12h達(dá)到高峰,隨后逐漸降低。各時間點蛋白表達(dá)水平較假手術(shù)組升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。E64D治療組6h、12h、

4、24h、48h的蛋白表達(dá)水平較模型組下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。3、HIBD模型組中SpectrinaⅡ降解產(chǎn)物在模型建立后2h即開始增高,持續(xù)升高至48小時。各時間點蛋白表達(dá)水平較假手術(shù)組升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。E64D治療組2h、6h、12h的蛋白表達(dá)水平較模型組下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。4.HIBD模型組左側(cè)大腦含水量較假手術(shù)組增加,有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01);E64D治療組與HIB

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