荷包牡丹堿對人胃癌SGC-7901細胞生長的作用及機制研究.pdf

1、目的：探討荷包牡丹堿對人胃癌SGC-7901細胞生長的抑制作用及其可能的機制，為胃癌的藥物治療提供一定的體外實驗研究的依據(jù)。
　　方法：將人胃癌SGC-7901細胞常規(guī)培養(yǎng)于含10％胎牛血清、青霉素-鏈霉素溶液(100X)、pH為7.2-7.3的RPMI1640培養(yǎng)液中，在37C、5％CO2及飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h、48h、72h。實驗分陰性對照組、溶劑DMSO組及荷包牡丹堿(25μmol/l、50μmol/l、100μmol

2、/l、200μmol/l)作用組。分別采用:1）四甲基偶氮唑藍(MTT)法測定細胞體外增殖情況;2）Hoechest33258染色觀察細胞凋亡形態(tài)學變化;3）流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率;4）Westernblot法檢測Bax、Bcl-2和Caspase-3的表達。
　　結(jié)果：1).SGC7901細胞與不同濃度的荷包牡丹堿培養(yǎng)后，細胞生長受到不同程度的抑制，并隨時間的延長抑制率逐漸升高，24h、48h、72h各時間段，荷包牡丹堿各濃度

3、組與陰性對照組相比，差別均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。而陰性對照組與溶劑組相較，差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。2).藥物作用72h后，行Hoechest33258染色可見陰性對照組及DMSO組細胞的細胞核呈卵圓形，染色均勻，藥物荷包牡丹堿組可見部分細胞核熒光增強，胞核縮小呈濃縮現(xiàn)象，細胞核的染色質(zhì)高度凝聚、熒光顯著增強，并有部分細胞核邊緣化，甚至裂解為碎塊，產(chǎn)生凋亡小體。3）.流式細胞術(shù)分析顯示:作用72h后，藥物荷包牡丹堿200

4、μmol/l組與陰性對照組及DMSO組相較，差別均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，而陰性對照組與DMSO組相較，差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05).4).Western blot法檢測顯示:與陰性對照組相比，藥物作用后Bcl-2表達降低，Bax、 Caspase-3表達升高，Bcl-2/Bax比例減小。
　　結(jié)論：1.荷包牡丹堿在體外對胃癌細胞的增殖與生長具有抑制作用。
　　2.荷包牡丹堿可促進胃癌細胞的凋亡。
　　3.荷