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1、目的:研究白樺酯酸(Betulinic acid,BetA)作用前后人CIK細(xì)胞對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞殺傷活性的變化并初步探討其機(jī)制。
方法:分離健康者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),體外經(jīng)多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)為CIK細(xì)胞,用不同濃度白樺酯酸作用于CIK細(xì)胞,四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)白樺酯酸對(duì)CIK細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)白樺酯酸作用前后CIK細(xì)胞PFP、GraB及CD107a的表達(dá);乳酸脫氫酶(LDH)釋
2、放法檢測(cè)白樺酯酸對(duì)CIK細(xì)胞殺傷胃癌SGC-7901細(xì)胞的影響;Western-blot檢測(cè)白樺酯酸作用前后CIK細(xì)胞細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)蛋白及接頭蛋白SLP-76、LAT的表達(dá)變化。
結(jié)果:白樺酯酸濃度在0.08~10μg/ml范圍時(shí),CIK細(xì)胞的增殖率較對(duì)照組顯著提高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);當(dāng)濃度為0.08~5μg/ml的白樺酯酸作用CIK細(xì)胞48h后,其PFP、GraB及CD107a的表達(dá)均有
3、所上調(diào);濃度0.3~1.25μg/ml的白樺酯酸作用48h后,對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901的殺傷活性顯著高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);濃度0.08~1.25μg/ml白樺酯酸作用后,CIK細(xì)胞的SLP-76、LAT及ERK1/2表達(dá)率較對(duì)照組顯著增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:適當(dāng)濃度的白樺酯酸能夠有效促進(jìn)CIK細(xì)胞的增殖,并增強(qiáng)其對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞的殺傷能力,其機(jī)制可能與白樺酯酸上調(diào)
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