白藜蘆醇誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制及其應(yīng)用研究.pdf

1、研究背景和目的：白藜蘆醇（Resveratrol，Res）是一種天然植物提取物，具有多種生物學(xué)功能，并對消化、血液、呼吸和生殖等多個系統(tǒng)來源的多種腫瘤有顯著的抑制作用，其本身無毒性作用，因此有望成為預(yù)防和治療腫瘤的新藥。關(guān)于Res的抗腫瘤作用機(jī)制目前還不十分清楚，可能與抑制細(xì)胞色素酶、抑制環(huán)氧合酶、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化以及提高機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答水平，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子分泌等有關(guān)。這無疑顯示了其在腫瘤治療中的潛在應(yīng)用價值。因此為了

2、進(jìn)一步研究Res在胃癌治療中的應(yīng)用價值，我們分別探討了Res及其聯(lián)合三氧化二砷（As2O3）、5-氟尿嘧啶（5-FU）和TRIAL在體內(nèi)、外對胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖和凋亡的作用及其作用機(jī)制，為將Res作為抗胃癌藥物的臨床應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：（1）以人胃癌SGC-7901細(xì)胞株為研究對象，不同濃度Res處理SGC-7901細(xì)胞24、48、72h后，以MTT法檢測細(xì)胞增殖抑制率，計(jì)算出Res對腫瘤細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度

3、（IC50），作為整個實(shí)驗(yàn)參照濃度；并用終濃度為IC50的Res處理細(xì)胞48h后，采用FCM檢測細(xì)胞凋亡率；TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡；免疫組織化學(xué)法檢測Fas、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表達(dá)；RT-PCR法檢測Fas、Bcl-2、Bax和Caspase-3mRNA的表達(dá)變化；（2）分別采用不同濃度的As203、5-FU單獨(dú)或與不同濃度的Res聯(lián)合處理SGC-7901細(xì)胞24、48、72h后，MTT法檢測細(xì)胞增殖抑制率，計(jì)

4、算出As2O3、5-FU單獨(dú)或與Res聯(lián)合處理對SGC-7901細(xì)胞增殖抑制的中效濃度以及聯(lián)合應(yīng)用指數(shù)，以檢測二者有無聯(lián)合增效作用；同時As2O3、5-FU單獨(dú)或與Res聯(lián)合處理SGC-7901細(xì)胞48h后，F(xiàn)CM檢測細(xì)胞凋亡率；TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡；（3）將Res與轉(zhuǎn)染了pBUD-TRAIL的質(zhì)粒的胃癌SGC-7901細(xì)胞共同培養(yǎng)，觀察其對腫瘤細(xì)胞的抑制作用。 結(jié)果：（1）不同濃度Res對胃癌SGC-7901細(xì)胞的增殖活性

5、均有抑制，并在一定范圍內(nèi)呈濃度，時間依賴性。與對照組相比，Res處理細(xì)胞48h后，S期細(xì)胞均明顯增多，細(xì)胞發(fā)生S期阻滯；72h后，F(xiàn)as、Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表達(dá)增強(qiáng)，Bcl-2蛋白及mRNA表達(dá)減弱；（2）Res分別與As203和5-FU聯(lián)合作用24h、48h、72h對胃癌SGC-7901細(xì)胞有生長抑制作用，兩種藥物聯(lián)合有協(xié)同增效作用；（3）Res聯(lián)合TRAIL基因可明顯促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。 結(jié)論：Res