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1、目的:比較膽管癌組織與正常膽管組織的蛋白質(zhì)組表達(dá)差異,尋找膽管癌相關(guān)的蛋白質(zhì),選擇敏感的分子標(biāo)志物。
方法:⑴根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求采集合適的標(biāo)本,液氮保存。對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理,盡量減少樣品中雜質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。⑵運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),對(duì)16例膽管癌患者的膽管癌組織和正常膽管組織進(jìn)行膠內(nèi)差異雙向凝膠電泳(2-DE),用PDQuest軟件對(duì)凝膠圖像進(jìn)行分析,比較蛋白質(zhì)點(diǎn)分布的差異情況。⑶選擇差異表達(dá)超過2倍的蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TO
2、F質(zhì)譜分析,并且通過數(shù)據(jù)檢索和生物信息學(xué)分析來鑒定出一些較有意義的差異蛋白質(zhì)。
結(jié)果:成功建立膽管癌組織和正常組織的雙向凝膠電泳圖譜,膽管癌組織和正常膽管組織平均蛋白質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)分別為1187和1148,其中表達(dá)差異超過2倍的斑點(diǎn)共有32個(gè),質(zhì)譜分析和數(shù)據(jù)庫檢索共鑒定出18種蛋白質(zhì),包括Fibroblast growth factor recptor substrate2(FRS2)、catenin,beta1、extrace
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