星形膠質(zhì)細(xì)胞鈣調(diào)蛋白對損傷后膠質(zhì)瘢痕形成作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討鈣調(diào)蛋白對體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷后增生及膠質(zhì)瘢痕形成的影響。 方法：體外純化培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞，機(jī)械劃痕法構(gòu)建星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷模型，采用激光掃描共聚焦動態(tài)觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷前后鈣離子濃度的變化，同時(shí)在損傷后應(yīng)用鈣調(diào)蛋白抑制劑三氟拉嗪（TFP）處理，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞增生的主要標(biāo)志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）表達(dá)的變化。 結(jié)果：（1）體外培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)鑒定，純度達(dá)95％以上；（2）

2、采用機(jī)械劃痕損傷的方法建立的星形膠質(zhì)細(xì)胞體外損傷模型與國內(nèi)外其它星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷模型中細(xì)胞增生的時(shí)間和形態(tài)特點(diǎn)基本一致；（3）星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷后細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度迅速上升，2min后明顯下降，此后逐漸下降，在15min左右接近基礎(chǔ)水平；（4）星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷后鈣調(diào)蛋白抑制劑TFP能夠抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞GFAP蛋白表達(dá)的增加。 結(jié)論：（1）成功培養(yǎng)出純度>95％星形膠質(zhì)細(xì)胞；（2）成功構(gòu)建了星形膠質(zhì)細(xì)胞體外機(jī)械劃痕損傷模型；（3）星形