huMSCs、huMSCs源生殖樣細(xì)胞免疫學(xué)特性的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（Human Umbilical Cord Wharton’s Jelly-derivedMesenchymal Stem Cells，huMSCs ）及其誘導(dǎo)分化為生殖樣細(xì)胞后的免疫學(xué)特性，為進(jìn)一步研究huMSCs 移植特性提供實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 分離培養(yǎng)huMSCs，在生殖細(xì)胞培養(yǎng)條件下定向誘導(dǎo)其分化，倒置相差顯微鏡下觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)。采用FACScan 流式

2、細(xì)胞儀檢測誘導(dǎo)前后huMSCs 表面抗原CD40、CD40L、CD80、CD86。半定量RT-PCR檢測誘導(dǎo)前后huMSCs的 HLA-I、HLA-DR基因表達(dá)水平的變化。用CCK-8 法檢測誘導(dǎo)前后的不同數(shù)量級huMSCs 對混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)體系中經(jīng)植物血凝素（PHA ）激活的同種異體外周血淋巴細(xì)胞(PBMC)增殖的影響。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA ）檢測誘導(dǎo)前后huMSCs 對經(jīng)PHA 活化的T 細(xì)胞分泌IFN-γ的影響。

3、r>　　 結(jié)果：
　　 huMSCs 在生殖細(xì)胞培養(yǎng)條件下能分化為生殖樣細(xì)胞，誘導(dǎo)前后的huMSCs 均表達(dá)HLA-I，不表達(dá)CD40、CD40L、CD80、CD86和HLA-DR。huMSCs 能抑制經(jīng)PHA 激活的T 淋巴細(xì)胞增殖，并抑制T 淋巴細(xì)胞IFN-γ的分泌，但huMSCs 源生殖樣細(xì)胞并不能抑制經(jīng)PHA 激活的T 淋巴細(xì)胞增殖及IFN-γ的分泌。
　　 結(jié)論：
　　 huMSCs 在體外生殖細(xì)胞培